[发明专利]棒束孢微菌核的培养方法及其应用

摘要

本发明公开了一种棒束孢微菌核的培养方法及其应用，发酵方法包括：1)制备棒束孢孢子接种体；2)微菌核诱导培养：将步骤1中制备的棒束孢孢子接种体加入诱导培养液中振荡培养6～8天；3)发酵液过滤，弃去上清液，得到微菌核沉淀，干燥，保存。还公开了棒束孢微菌核在防治粉虱类害虫中的应用以及一种防治粉虱类害虫的生防制剂。本发明方法生产的微菌核能够适应高温、干旱、强紫外等外界不良环境，具有抗逆耐储、货架期长和持续控害的特点；微菌核发酵周期短，生产成本低、工艺可控性强，所用原料易于获取。微菌核可以用作制备新型杀虫真菌制剂的活性成分。

主权项

1.一种棒束孢微菌核的培养方法，其特征在于：包括以下步骤：1）制备棒束孢孢子接种体：将活化的棒束孢的孢子或菌丝体接种于PDA平板培养基上，在22～25℃下培养10～14天，用0.1～0.5% Tween‑80将平板上的分生孢子洗下，制备成1.0×10⁸孢子/毫升的孢子悬浮液，按照5%的接种量接种到1/4SDA液体培养基中培养24‑36h，即得到用于微菌核诱导培养的接种体；2）微菌核诱导培养：将步骤1）中制备的棒束孢孢子接种体加入诱导培养液中，25～28℃，200～250 rpm摇床振荡培养6～8天；所述诱导培养液中含有的原料及其含量如下：KH₂PO₄：3.5～4.5 g/L、CaCl₂·2H₂O：0.7～0.9g/L、MgSO₄·7H₂O：0.5～0.7g/L、CoCl₂·6H₂O：36～38 mg/L、MnSO₄·H₂O：15～17mg/L、ZnSO₄·7H₂O：13～15mg/L、FeSO₄·7H₂O：0.15～0.35 g/L、维生素K3：0.0096‑0.0172g/L、二甲亚砜溶液：0.05‑0.1mL/L、葡萄糖：17～35 g/L、酵母膏：4.5～5.5 g/L、蛋白胨：2.0～3.0g/L；将步骤2)振荡培养得到的发酵液过滤，弃去上清液，得到微菌核沉淀，干燥，保存。