[发明专利]一种从尖吻蝮蛇蛇毒提纯磷酸二酯酶的方法在审
| 申请号： | 201610180643.8 | 申请日： | 2016-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN105969749A | 公开（公告）日： | 2016-09-28 |
| 发明（设计）人： | 王东;何万臣;林锋 | 申请（专利权）人： | 中鑫东泰（莱阳）纳米基因生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/16 | 分类号： | C12N9/16 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 265200 山东省*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种纯化蛇毒磷酸二酯酶的方法，以尖吻蝮蛇（Deinagkistrodonacutus）蛇毒冻干粉为原料，用PH6.81的磷酸盐缓冲液溶解，经过CM SepHarose FF、Superdex 200和SepHarose G25纯化，最终的得到电泳纯的蛇毒磷酸二酯酶，本发明以尖吻蝮蛇蛇毒为原料，提供了一种快速、经济、有效地从尖吻蝮蛇蛇毒中提取磷酸二酯酶的纯化方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 蝮蛇 蛇毒 提纯 磷酸二酯酶 方法 | ||
【主权项】：
一种从尖吻蝮蛇蛇毒提纯磷酸二酯酶的方法，其特征在于：以尖吻蝮蛇蛇毒冻干粉为原料提取蛇毒磷酸二酯酶，该方法包括以下步骤： a、将冻干的尖吻蝮蛇蛇毒粉溶于pH6.81的磷酸盐缓冲液，溶液经0.22nm滤膜过滤除菌；b、将原料液上样于PH6.81磷酸盐平衡的CM SepHarose FF层析柱，上样完毕后，以20ml/min的流速通PH6.81的磷酸盐缓冲液，待流穿峰流尽，紫外信号回复至基线后，改为线性洗脱，洗脱条件为NaCl浓度从0mol/L升至0.3mol/L，6个柱体积，流速20ml/min；c、洗脱物经浓缩，上样于Superdex 200，保留活性部分；d、活性部分经SepHarose G25除盐，得到纯化后的尖吻蝮蛇蛇毒磷酸二酯酶原液。
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