[发明专利]一种产脂肪烃基因的高通量筛选方法及获得的突变体与应用有效
| 申请号： | 201610183720.5 | 申请日： | 2016-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN105802983B | 公开（公告）日： | 2019-12-03 |
| 发明（设计）人： | 吕雪峰;吴伟;梁雅静;张磊 | 申请（专利权）人： | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所;波音(中国)投资有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/81;C12N15/74;C12N1/21;C12N1/19;C12N9/02;C12N9/88;C12P5/02 |
| 代理公司： | 23211 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 | 代理人： | 杨佳龙<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 266101 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种产脂肪烃基因的高通量筛选方法及获得的突变体与应用，属于生物工程技术领域。本发明所提供的方法是将携带潜在产脂肪烃基因的载体导入到携带有检测元件的宿主细胞中，培养宿主细胞，通过对检测元件信号响应鉴别目的基因的表达情况，并分离高产脂肪烃的突变体。同时，本发明还提供了利用所述筛选方法获得的脂肪醛脱甲酰加氧酶突变体。本发明提供的脂肪醛脱甲酰加氧酶突变体具有较该酶野生型具有更高的脂肪烃合成效率。本发明提供的高产脂肪烃基因的高通量筛选方法有助于快速的从具有潜在产烃能力的备选基因及其突变体文库中筛选出具有更高产烃效率的特定基因或突变体。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 脂肪 基因 通量 筛选 方法 获得 突变体 应用 | ||
【主权项】：
1.一种产脂肪烃基因的高通量筛选方法，其特征在于，将携带潜在产脂肪烃基因的载体导入到携带有检测元件的宿主细胞中，培养宿主细胞，通过对检测元件信号响应鉴别筛选目的基因的表达情况，并分离高产脂肪烃的突变体；所述检测元件，包括脂肪烃检测元件和报告元件，所述脂肪烃检测元件，至少包含一个组成型启动子、一个转录调控因子和一个烃响应特性的启动子；所述报告元件，是绿色荧光蛋白、LacZ基因、荧光素酶或抗性基因中的一种；所述组成型启动子为启动子PalkS，其核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；所述转录调控因子，为转录调控因子AlkR，氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；所述烃响应特性启动子，是启动子PalkM，核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；所述宿主细胞为大肠杆菌。/n
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