[发明专利]一种猴头菇蛋白肽-硒螯合物的制备方法

摘要

本发明公开了一种猴头菇蛋白肽‑硒螯合物的制备方法，利用碱溶酸沉法或硫酸铵沉降法提取猴头菇中的蛋白质；采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶或复合蛋白酶对猴头菇蛋白进行限制性酶解后，灭酶，制备猴头菇蛋白酶解液；利用无机物亚硒酸钠中的硒与猴头菇蛋白肽螯合获得猴头菇蛋白肽‑硒螯合物。本发明显著提高了猴头菇蛋白的提取率，提取率达80.55%~85.75%；本发明制备的矿质元素‑肽螯合物具有独特的螯合体制和转运机制，易被吸收、安全无毒、价格低、可同时补充氨基酸和矿质离子，制备的猴头菇蛋白肽‑硒螯合物中硒含量为2561~3818μg/g，为开发有机硒营养补充剂与功能性食品提供理论依据和技术支持。

主权项

一种猴头菇蛋白肽‑硒螯合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）猴头菇蛋白提取：利用碱溶酸沉法或用硫酸铵沉降法提取猴头菇蛋白；所述碱溶酸沉法的具体操作如下：首先将猴头菇超微粉碎，将粉碎后的猴头菇与蒸馏水混合，利用NaOH或KOH溶液调节pH至9.0‑11.0，超声提取后进行水浴提取，提取后过滤，滤液为碱提的猴头菇蛋白溶液，用盐酸调节碱提的猴头菇蛋白溶液pH至2.0‑4.0进行蛋白沉淀，离心得沉淀蛋白，水洗至中性再次离心，将沉淀冷冻干燥即得猴头菇蛋白；所述硫酸铵沉降法的具体操作如下：首先将猴头菇超微粉碎，将粉碎后的猴头菇与蒸馏水混合，逐步加入固体硫酸铵使硫酸铵的饱和度达40‑60wt%，离心得猴头菇蛋白沉淀，利用透析法脱盐后冷冻干燥得猴头菇蛋白；（2）酶解：将步骤（1）得到的猴头菇蛋白溶解在水中使蛋白质量浓度达1.0‑5.0wt%，调节pH至7.0‑10.0，温度保持在40‑60℃，加入蛋白酶水解30‑120min，灭酶，得到猴头菇蛋白多肽复合物溶液；（3）多肽‑硒螯合物制备：利用固体高温混合法或者液体螯合法制备猴头菇蛋白肽‑硒螯合物；所述固体高温混合法的具体操作如下：将步骤（2）得到的猴头菇蛋白多肽复合物溶液冷冻干燥制成猴头菇蛋白多肽复合物冻干粉，并加入亚硒酸钠粉末混合，300‑500℃加热制备猴头菇蛋白肽‑硒螯合物；所述液体螯合法的具体操作如下：往步骤（2）得到的猴头菇蛋白多肽复合物溶液中加入亚硒酸钠溶液，搅拌均匀，调节pH为6.0‑9.0，在20‑80℃条件下持续反应0.5‑2.0h，反应后冷却，离心分离去除杂质，加入3‑5倍体积75‑95wt%的乙醇，沉淀静置12h，离心去除上清液，获得猴头菇蛋白肽‑硒螯合物；（4）将步骤（3）得到的猴头菇蛋白肽‑硒螯合物进行冷冻干燥。