[发明专利]一种绿秋葵的组织培养方法

摘要

本发明公开了一种绿秋葵的组织培养方法，属于植物生物技术领域。包括外植体的制备，选取成熟、饱满的绿秋葵种子，先在流水中冲洗2‑3h，然后在超净工作台中用70%酒精消毒30s，0.15%的氯化汞消毒6‑8min，无菌水冲洗5‑6次，然后将已经消毒的种子在无菌水中浸泡12‑24h。把浸泡后的种子接入MS培养基中，在荧灯光下培养5‑7d，待子叶展平，然后切取带有部分下胚轴的2.0‑2.5cm的带柄子叶，接入添加了0.05 mg/L NAA和0.5 mg/L 6‑BA的MS培养基中培养20d，然后切取由带柄子叶长出的两叶一心的顶芽接入添加了0.10 mg/L NAA的1/2MS培养基中，然后转入蓝红组合光5:3的发光二极管（LED）光下培养30d。蓝红组合光5:3的发光二极管（LED）光适合绿秋葵组培苗的生长。本发明具有操作简单、植株生长快速健壮，节省能源环保等优点，将在黄秋葵离体快繁或分子育种的研究中发挥重要作用，实际应用价值高。

主权项

1.一种提高绿秋葵组培苗叶片中类胡萝卜素的组织培养方法，包括以下步骤：1)外植体的制备：选取成熟、饱满的绿秋葵种子，先在流水中冲洗2‑3h，然后在超净工作台中用70％酒精消毒30s，0.15％的氯化汞消毒6‑8min，无菌水冲洗5‑6次，然后将已经消毒的种子在无菌水中浸泡12‑24h，把浸泡后的种子接入MS培养基中，先在荧灯光下培养5‑7d，待子叶展平后切取带柄子叶为外植体，切取带有部分下胚轴的2.0‑2.5cm的带柄子叶，接入添加了0.05mg/L NAA和0.5mg/L 6‑BA的MS培养基中培养20d，切取由带柄子叶长出的两叶一心的顶芽为外植体；2)光质处理：然后切取由带柄子叶长出的两叶一心的顶芽接入添加了0.10mg/L NAA的1/2MS培养基中，然后转入蓝红组合光5:3的发光二极管下培养30d，保持光强为50μmol·m‑2·s‑1，光周期为12小时，培养湿度70±5％，培养温度24‑26℃；3)光源：所述的光照处理的光源是一组发光二极管灯管，所述的光强是通过调整灯的数量和灯到植株冠层的距离来控制，所述的光周期采用一个定时装置来控制。