[发明专利]一种熊去氧胆酸制备方法有效
| 申请号： | 201610192346.5 | 申请日： | 2016-03-30 |
| 公开（公告）号： | CN105861613B | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | 秦和平;张和平;梁待亮;欧松;娄良;沈惠宾;阮宇峰;王明宗 | 申请（专利权）人： | 中山百灵生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12P33/06 | 分类号： | C12P33/06 |
| 代理公司： | 44345 中山市兴华粤专利代理有限公司 | 代理人： | 吴剑锋 |
| 地址： | 528400 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种熊去氧胆酸制备方法，其特征在于包括以下步骤：将鹅去氧胆酸和溶剂A加入反应容器中，搅拌溶解，加入7‑αHSDH和7‑βHSDH以及辅酶II，控制反应温度和pH值，将鹅去氧胆酸转化为熊去氧胆酸，得转化液；将步骤A中的转化液升温，使7‑αHSDH和7‑βHSDH变性，采用高速离心机离心除去蛋白，溶液中加入氢氧化钠溶液，蒸馏除去溶剂A，加水溶解蒸馏残留物，加酸结晶，得到熊去氧胆酸粗品；将步骤B中的熊去氧胆酸粗品和溶剂B加入反应容器中，升温并回流1小时，降温至常温，过滤得到纯度大于99％熊去氧胆酸。本发明工艺简单，合成路线短，转化率高，后处理更容易，环境更友好的熊去氧胆酸制备方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 熊去氧 胆酸 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种熊去氧胆酸制备方法，其特征在于包括以下步骤：/nA、将鹅去氧胆酸、溶剂A和PB缓冲液加入反应容器中，搅拌溶解，加入7-αHSDH和7-βHSDH以及辅酶II，控制反应温度20-30℃和pH值6.5-7.5，将鹅去氧胆酸转化为熊去氧胆酸，得转化液；其中所述的溶剂A为仲丁醇、仲戊醇、正丁醇中的一种；/nB、 将步骤A中的转化液升温，使 7-αHSDH和7-βHSDH变性，采用高速离心机离心除去蛋白，上层清液倒入分液漏斗中静置分层，下层水相弃去，有机相中加入1.1g氢氧化钠，真空蒸馏除去溶剂A，加水100ml溶解蒸馏残留物，加1:1盐酸调节溶液酸性结晶，得到熊去氧胆酸粗品；/nC、 将步骤B中的熊去氧胆酸粗品和溶剂B加入反应容器中，升温并回流1小时，降温至常温，过滤得到纯度大于99%熊去氧胆酸，其中溶剂B为丙酮或乙酸乙酯。/n
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