[发明专利]一种肉类中沙门氏菌含量的检测方法

摘要

本发明涉及食品检测领域，公开了一种肉类中沙门氏菌含量的检测方法，步骤如下：样品制备；空白样品制备；获取八份不同已知浓度的沙门氏菌溶液；已知浓度样品的制备；确定沙门氏菌与掺硼金刚石膜电极响应电流的依从关系；待测样品的检测。本发明能够检测出肉类中沙门氏菌的含量，大大降低了人们感染沙门氏菌的几率，有利于人们的身体健康，本发明检测方法具有操作简单、不易受干扰、检测时间短、检测准确度高等优点。

主权项

一种肉类中沙门氏菌含量的检测方法，其特征在于，步骤如下：1)样品制备，称取适量肉类样品，使用12‑15倍的生理盐水均质拍打15‑20min，并在4000‑5000rmp下离心分离10‑15min，过滤，取上层清液，将残渣再次加入8‑10倍的生理盐水均质拍打15‑20min，并在4000‑5000rmp下离心分离10‑15min，过滤，取上层清液，合并两次的上层清液，获得上层总液，备用；2)空白样品制备，称取适量不含沙门氏菌的空白肉类样品，按照步骤1)，获取空白上层总液，备用；3)获取八份不同已知浓度的沙门氏菌溶液，取第一个浓度沙门氏菌菌液用无菌生理盐水稀释10³、10⁴、10⁵、10⁶、10⁷、10⁸倍，各取200μL沙门氏菌的稀释液分别注入到12个培养皿中(每个稀释倍数做平行样)，将各个培养皿中的稀释液分别涂布于LB平板上，于35～37℃培养箱中培养24h,计数每个平板上的可疑菌落数,挑取可疑菌落进行生化和血清学鉴定验证后，得到1个已知浓度的沙门氏菌溶液。以同样的步骤对第二个浓度进行培养分析，以此类推得到多份不同已知浓度的沙门氏菌溶液；4)已知浓度样品的制备，称适量步骤2)制备的空白上层总液，均分为八份，并分别加入同等体积的步骤3)制备的已知浓度的沙门氏菌溶液，获得八份已知浓度样品；5)确定沙门氏菌与掺硼金刚石膜电极响应电流的依从关系，采用CHI660D电化学工作站用电化学计时电流的方法快速检测沙门氏菌的浓度，以掺硼金刚石膜电极为工作电极，铂丝电极为对电极，饱和甘汞电极为参比电极，设置工作电极的检测电位为0.9～1.15V，电解池中为pH7.2～7.6的磷酸‑磷酸盐缓冲溶液；将上述步骤4)获得的八份已知浓度样品逐一进样，记录每次进样时掺硼金刚石膜电极的响应电泳的电流值，根据全部进样的沙门氏菌液浓度和与其对应响应电流的电流值作曲线，得到响应电流‑沙门氏菌浓度曲线，该曲线为一直线，确定沙门氏菌与掺硼金刚石膜电极响应电流的依从关系为线性关系；6)待测样品的检测，称取待测肉类样品，按照步骤1)，获取待测上层总液，将待测上层总液进样，记录掺硼金刚石膜电极的响应电泳的电流值，结合步骤5)获得的响应电流‑沙门氏菌浓度曲线，得出待测肉类样品中的沙门氏菌浓度。