[发明专利]一种同时制备人尿激肽原酶粗制品和人尿胰蛋白酶抑制剂粗制品的方法

摘要

本发明涉及一种尿蛋白的提取方法，尤其涉及一种制备人尿激肽原酶粗制品的方法。本发明提供的制备人尿激肽原酶粗制品的方法是采用阴离子交换树脂作为吸附剂吸附尿液中的尿蛋白，然后收集吸附尿蛋白的树脂，集中洗脱，接着将洗脱液通过阳离子交换树脂吸附人尿激肽原酶，从而实现人尿激肽原酶和人尿胰蛋白酶抑制剂的分离。本发明提供的制备人尿激肽原酶粗制品的方法可以有效的分离人尿激肽原酶和人尿胰蛋白酶抑制剂，便于人尿激肽原酶和人尿胰蛋白酶抑制剂后续的纯化处理，提高纯化率，而且该方法实现了两种蛋白粗制品的联产，可以大大的降低生产成本。

主权项

一种同时制备人尿激肽原酶粗制品和人尿胰蛋白酶抑制剂粗制品的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1将阴离子交换树脂作为吸附剂放置尿池或尿斗中，收集已吸附尿蛋白的阴离子交换树脂，其中，S1中的阴离子交换树脂为强碱型阴离子交换树脂；S2将步骤S1得到的阴离子交换树脂用浓度为0.6‑0.8mol/L的NaCl溶液进行洗脱，收集洗脱液；S3将步骤S2得到的洗脱液进行超滤浓缩，调节超滤浓缩液的pH值为3.4‑4.0，电导为1‑4Ms/cm；S4将步骤S3得到的浓缩液上样已经用平衡液平衡好的阳离子交换树脂，冲洗，所述阳离子交换树脂的平衡液为0.01‑0.5mol/L的醋酸‑醋酸钠缓冲液，电导为0.05‑8Ms/cm，pH值为3.9；S5用洗脱液洗脱步骤S4得到的阳离子交换树脂，收集洗脱液，在洗脱液中加入65%硫酸铵粉末搅拌20‑30min，静置3‑4h后，收集沉淀，得人尿激肽原酶粗制品，其中，S5中的洗脱液为0.01‑0.5mol/L醋酸‑醋酸钠缓冲液，0.01‑0.5mol/L的NaCl溶液，pH值为4‑7；S6在步骤S4中收集上样穿透液和冲洗穿透液，加入60%硫酸铵粉末搅拌20‑30min，静置3‑4h后，收集沉淀，得人尿胰蛋白酶抑制剂粗制品。