[发明专利]基于单增李斯特菌毒力基因的三重实时荧光定量PCR检测用引物、MGB探针及检测方法在审
| 申请号： | 201610206434.6 | 申请日： | 2016-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN105821123A | 公开（公告）日： | 2016-08-03 |
| 发明（设计）人： | 刘二龙;袁慕云;卢丽;孙薇;许龙岩;吕英姿;蒋湘 | 申请（专利权）人： | 刘二龙;袁慕云;卢丽;孙薇;许龙岩;吕英姿;蒋湘 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 任重 |
| 地址： | 510730 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于单增李斯特菌毒力基因的三重实时荧光定量PCR检测用引物、MGB探针及检测方法。本发明针对单增李斯特菌hlyA、inlA和plcB基因科学设计特异性引物，其DNA序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6所示；同时提供MGB探针，其DNA序列如SEQ ID NO.7～SEQ ID NO.9所示。基于所述引物和MGB探针，本发明整体优化了实时荧光PCR检测体系和的反应程序条件，成功建立了高通量的单增李斯特菌的TaqMan ‑MGB探针三重实时荧光定量PCR检测方法，操作简单、安全，最低检测细菌浓度为100CFU/mL，整个扩增过程在50min以内，具有更加高的灵敏度、特异性和稳定性，可以很好地满足食品安全中监管中单增李斯特菌的快速检测和鉴定，能快速、准确测定样本中单增李斯特菌的含量，同时可以分析单增李斯特菌菌株的三个毒力基因携带情况，可用于其流行病学溯源和毒力强弱分析。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 李斯特 毒力 基因 三重 实时 荧光 定量 pcr 检测 引物 mgb 探针 方法 | ||
【主权项】：
一组基于单增李斯特菌的特异性毒力基因的三重实时荧光定性和/或定量PCR检测用的特异性引物，其特征在于，所述特异性毒力基因为hlyA、inlA和plcB，所述的引物的序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。
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