[发明专利]一种成株期小麦纹枯病的鉴定评价方法

摘要

本发明公开了一种成株期小麦纹枯病的鉴定评价方法，是在小麦拔节期将布满小麦纹枯病菌丝的牙签嵌入到基部第1～2叶鞘之间，弥雾器喷水保湿7d，在乳熟期调查统计纹枯病发病程度；计算病情指数，根据鉴定材料与对照品种的病情指数进行比较对鉴定材料进行抗纹枯病性评价。

主权项

1.一种成株期小麦纹枯病抗性的鉴定评价方法，其步骤为：(1)将代表性强致病力小麦纹枯病菌(Rhizactonia cerealis)菌种在超净工作台上于PDA固体培养基上活化培养，获得菌丝；(2)将木质牙签浸泡24小时，对折，牙签尖头朝上直立整齐放入不锈钢饭盒中，配制PDA培养基，将牙签与培养基常规高压蒸气灭菌后，在超净工作台上将灭菌后未冷却的PDA培养基倒入饭盒，使其将牙签1/2浸没，待浸没牙签的PDA培养基冷却后，将事先在培养皿中培养好的小麦纹枯病菌菌株无菌操作移入含牙签的PDA固体培养基中，每个饭盒移入大小为1cm×1cm的布满菌丝的培养基块5块，5块带菌培养基在含牙签的PDA固体培养基中均匀分布，接种后用封口膜封住饭盒，再放入25℃恒温箱中培养14d～21d，培养过程中每隔7d在超净工作台上查看菌丝生长情况，待菌丝长满牙签后形成有菌牙签备用；(3)同时种植待鉴定材料和对照品种，对照品种选用扬麦158为感病对照S_ck，宁麦9号为中抗对照MR_ck，Niavt14为抗病对照R_ck，在小麦拔节期，用消毒镊子夹取有菌牙签，将牙签携带菌丝的尖头一端轻轻地嵌入麦苗基部第1～2叶鞘之间，每个叶鞘嵌入一个有菌牙签，每份待鉴定材料接种30个茎杆，接种后，通过弥雾喷洒接种材料基部进行保湿，每天喷水一次，连续喷水7d，然后对幼苗进行正常生长管理；(4)在接种材料乳熟期，调查嵌有接菌牙签茎杆的纹枯病病害等级，纹枯病田间病情分级标准如下：0级：全株无病；1级：叶鞘有典型的纹枯病病斑，但不侵茎；2级：病菌侵入茎秆，但病斑宽度不超过茎秆周长的1/4；3级：病菌侵入茎秆，病斑宽度占茎秆周长的1/4～1/2；4级：病菌侵入茎秆，病斑宽度占茎秆周长的1/2～3/4；5级：病菌侵入茎秆，病斑宽度超过茎秆周长的3/4，或茎秆已软腐、出现枯孕穗或枯白穗；(5)计算对照品种和待评价材料的纹枯病病情指数，式中X₁、X₂、X₃、X₄、X₅分别表示纹枯病1级、2级、3级、4级、5级茎秆数；(6)根据病情指数对参试材料的成株期纹枯病抗性进行评价，抗性分级标准：抗病R：DI<DI_CK‑R；中抗MR：DI_CK‑R≤DI<DI_CK‑MR；中感MS：DI_CK‑MR≤DI<DI_CK‑S；感病S：DI≥DI_CK‑S。