[发明专利]一种检测多种鸡细胞因子化学发光成像免疫传感器的制备及分析方法

摘要

本文发明了一种检测多种鸡细胞因子化学发光成像免疫传感器的制备及分析方法，成像免疫传感器用硅烷化的可抛式玻片制得，将不同鸡细胞因子捕获抗体用共价结合的方式包被于相应结合位点，信号分子辣根过氧化物酶与标记抗体共同固定在金纳米粒子上，实现信号放大。基于夹心免疫反应，每一个检测位点捕捉到的HRP会触发化学发光，信号由电荷耦合器CCD收集，用于多种鸡细胞因子的同时检测。这种方法具有高通量、易操作、低成本等优点，可实现对多种鸡细胞因子的同时检测，其稳定性，可重复性及准确性使多种鸡细胞因子的化学发光成像免疫检测技术在禽类疾病检测中显示了很好的应用前景。

主权项

一种检测多种鸡细胞因子化学发光成像免疫传感器的制备及分析方法，其特征在于以下步骤：(1)利用丝网印刷技术并借助模板在环氧硅烷化的载玻片表面制作反应阵列；(2)取不同的鸡细胞因子捕获抗体分别滴涂在免疫阵列的不同行，室温下反应后，再放置在4℃下直至晾干，磷酸盐缓冲溶液冲洗；继续滴涂封闭缓冲液在4℃封闭，磷酸盐缓冲溶液冲洗后即得到该多种鸡细胞因子的免疫传感器；(3)将不同的鸡细胞因子抗原样品滴入相应的免疫传感阵列的微孔中，温育后，再分别滴入相应的纳米金信号放大探针，夹心免疫反应后，通入发光底物后，利用电感耦合CCD同时检测不同细胞因子的化学发光信号。