[发明专利]β-谷甾醇作为橄榄油和油茶籽油鉴别标记物的建立方法

摘要

本发明公开了一种β‑谷甾醇作为橄榄油和油茶籽油鉴别标记物的建立方法。首先取β‑谷甾醇标准品配成不同浓度，用气相色谱仪检测得到不同浓度的峰面积，经计算得到峰面积与浓度关系的标准曲线和计算公式。然后分别从油茶籽、橄榄果子提取的油茶籽油和橄榄油，或商品油取微量样品进行高温皂化处理，用石油醚萃取β‑谷甾醇，用气相色谱仪检测得到样品中β‑谷甾醇的峰面积，将峰面积代入标准曲线和计算公式，得到样品的β‑谷甾醇含量。最后，对所有油茶籽油、橄榄油的β‑谷甾醇含量作差异统计分析，得出油茶籽油、橄榄油的β‑谷甾醇含量。本发明样品前处理简单，数据直观可靠，重复性好。

主权项

一种β‑谷甾醇作为橄榄油和油茶籽油鉴别标记物的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）取β‑谷甾醇标准品，用色谱级正己烷配制成梯度溶液，通过GC测定，建立标准曲线；（2）将橄榄果破碎去壳，用物理压榨法提取橄榄油；通过化学溶剂法提取油茶籽油；（3）取微量标准橄榄油或者油茶籽油；橄榄油的取样量为5 mg，油茶籽油为100 mg；（4）加入氢氧化钾‑乙醇溶液对样品进行高温皂化处理；（5）冷却至室温，加入饱和氯化钠溶液后用石油醚萃取样品中的β‑谷甾醇；（6）静置分层，分离上清液后加入纯水，洗至中性；（7）静置分层，分离上清液后加入少量无水硫酸钠；（8）震荡后离心，取上清液并用氮气吹干；（9）加入有机溶剂复溶后过膜；所述有机溶剂为正己烷，过0.45 μm的有机膜；（10）氮气吹干后加入正己烷复溶后进GC进行检测；（11）将气相色谱图上β‑谷甾醇峰面积参考标准曲线得到β‑谷甾醇含量；对油茶籽油和橄榄油β‑谷甾醇含量进行差异性分析；所述的差异性分析采用方差分析，得到橄榄油和油茶籽油中β‑谷甾醇含量差别p值；（12）利用GC‑MS对样品中β‑谷甾醇和标准品β‑谷甾醇的出峰时间、碎片图和化学结构进行比对；（13）确认β‑谷甾醇适合作为鉴别茶籽油、橄榄油的标记物。