[发明专利]一种人体氧化低密度脂蛋白的酶联免疫检测试剂盒及其制备方法

摘要

一种人体氧化低密度脂蛋白的酶联免疫检测试剂盒及其制备方法。本发明属于体外检测诊断试剂领域，具体涉及一种人体内的Ox‑LDL含量测定的试剂盒及制备与应用。其包括固相化有特异性结合氧化低密度脂蛋白新型配体结构的重组蛋白P.rβ2‑GPI‑DV或E.coli重组蛋白rβ2‑GPI‑DV的酶标板、不同浓度的氧化低密度脂蛋白标准对照样品、质控品、酶标记的抗体、稀释液、清洗液、显色液A、显色液B和终止液。本发明所使用的酵母重组蛋白P.rβ2‑GPI‑DV或E.coli重组蛋白rβ2‑GPI‑DV通过结合oxLDL新型配体识别位点检测的Ox‑LDL是具有致动脉粥样硬化、心血管疾病、非酒精性脂肪性肝病炎症反应的致病性Ox‑LDL，对于伴有动脉粥样硬化、脂质代谢异常以及炎症反应特质的疾病的精准辅助诊断具有应用价值，本发明所用检测仪器简单，检测成本低，非专业人员即可实现检测操作。

主权项

一种人体氧化低密度脂蛋白的酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，其包括固相化有特异性结合氧化低密度脂蛋白的重组蛋白的酶标板、不同浓度的氧化低密度脂蛋白标准对照样品、质控品、酶标记的抗体、稀释液、清洗液、显色液A、显色液B、终止液；其中，固相化有特异性结合氧化低密度脂蛋白的重组蛋白的酶标板中的酶标板为聚苯乙烯的96微孔板、固相化的特异性重组蛋白为酵母重组表达的重组蛋白P.rβ2‑GPI‑DV或E.coli重组蛋白rβ2‑GPI‑DV，试剂盒微孔板上固相化的重组蛋白的数量为50ug/孔；质控品为含有5％蔗糖的0.5U和20U的氧化低密度脂蛋白纯品各2支，每支5ml，其中1U定义为2.5ug；酶标记的抗体为辣根过氧化物酶标记的羊抗人抗apoB抗体，辣根过氧化物酶标记的抗apoB抗体为1支、10ul；不同浓度的氧化低密度脂蛋白标准对照样品为6支、各2ml，氧化低密度脂蛋白标准对照品均为氧化低密度脂蛋白的纯品与氧化低密度脂蛋白标准品稀释液按照0U、1U、2U、4U、8U、16U稀释而成，，氧化低密度脂蛋白标准品稀释液是在PH 7.4的磷酸盐缓冲液中，分别加入5％的蔗糖及1U、2U、4U、8U、16U的氧化低密度脂蛋白，1U定义为25μg；稀释液为是PH7.4的磷酸盐缓冲液，10ml、1支；清洗液为每升含5ml吐温20的磷酸盐缓冲液，50ml，1支；显色液A是在1M的柠檬酸盐溶液中加入质量分数为1％的30％的过氧化氢，5ml、1支；显色液B是每升中含有10ug的OPD水溶液，10ml、1支；终止液是2N的浓硫酸溶液，10ml、1支。