[发明专利]一种甘薯茎线虫病室内抗侵入性鉴定方法

摘要

本发明公开一种甘薯茎线虫病室内抗侵入性鉴定方法，属农业植物保护领域，该方法选用表皮完好的待测薯块，进行表面消毒及高温愈合处理；消毒后的线虫悬浮液滴加到创可贴止血棉上，贴于待测薯块表面，后用保鲜膜包裹保湿；将接种茎线虫的薯块在25℃，80％湿度条件下暗培养30d后取出，去除创可贴；沿接种位点横切，测量薯块横截面周长及表皮层发病组织周长，再沿接种位点将薯块纵切，测量薯块长度及发病组织长度；计算发病组织面积与薯块表面积比值及防治效果，根据平均防效进行分级，评价甘薯品种的抗感特性。该鉴定方法科学有效，操作简单，实验周期短，较好的避免接种线虫的流失及固定侵入位点，能够准确表现甘薯品种对茎线虫病的侵入抗性。

主权项

一种甘薯茎线虫病室内抗侵入性鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：1)茎线虫分离及消毒：在田间采集发病薯块，用浅盘法分离获得茎线虫悬浮液，将获得的茎线虫悬浮液离心浓缩，弃上清，用消毒液对茎线虫表面消毒1h，用灭菌水清洗3次，配成浓度为1000头/ml的线虫悬浮液，4℃保存备用；2)参试甘薯品种准备：挑选表皮完好的待鉴定甘薯品种薯块，清洗干净后用75％酒精消毒，消毒后将待鉴定薯块在35℃，85‑90％湿度环境下高温愈合24h，消除薯块表面的细微伤口，高温愈合后的薯块置于已消毒的塑料箱中保存备用，选取完好的栗子香薯块进行相同处理，作为感病对照；3)接种鉴定：用移液器吸取200μl线虫悬浮液滴加到创可贴的止血棉上，将带有线虫的创可贴贴于薯块中部表面，后用保鲜膜包裹保湿，接种线虫后的薯块置于消毒的塑料箱中，在25℃,80％湿度条件下暗培养30d，进行调查评价；4)调查评价：去除薯块表面的保鲜膜及创可贴，测量薯块外表面长度L，沿接种位点将薯块横切，测量薯块截面周长A，及薯块表皮层内发病组织的横向长度a，再将薯块沿接种位点纵切，测量发病组织纵向长度l；5)防效计算方法：依据薯块病健面积比R，即发病组织面积与薯块表面积的比值评价薯块的发病程度，根据步骤4)的测量数据，病健面积比的计算方法为R＝al/AL，防治效果通过对照病健面积比与测试品种病健面积比的差值除以对照病健面积比进行计算，具体计算公式如下：6)分级标准：通过防效数值的范围评价测试甘薯品种的抗性等级，具体分级标准为：高抗：平均防效≥80％；抗病：60％≤平均防效＜80％；中抗：40％≤平均防效＜60％；感病：20％≤平均防效＜40％；高感：平均防效＜20％。