[发明专利]使用工程化的解酯耶氏酵母生产高蛋白秸秆饲料的方法

摘要

本发明涉及一种使用工程化的解酯耶氏酵母生产高蛋白秸秆饲料的方法，其特征在于，使用分别转入了密码子优化的β‑葡萄糖苷酶编码基因、密码子优化的外切葡聚糖酶编码基因和密码子优化的内切葡聚糖酶编码基因的三种工程化的解酯耶氏酵母的混合物对秸秆与氯化铵的混合物发酵来生产所述饲料成分，其中，所述密码子优化的β‑葡萄糖苷酶编码基因序列如SEQ ID NO1所示，所述密码子优化的外切葡聚糖酶编码基因序列如SEQ ID NO2所示，并且所述密码子优化的内切葡聚糖酶编码基因序列如SEQ ID NO3所示。

主权项

一种使用工程化的解酯耶氏酵母生产饲料成分的方法，其特征在于，使用分别转入了密码子优化的β‑葡萄糖苷酶编码基因、密码子优化的外切葡聚糖酶编码基因和密码子优化的内切葡聚糖酶编码基因的三种工程化的解酯耶氏酵母的混合物对秸秆与氯化铵的混合物发酵来生产所述饲料成分，其中，所述密码子优化的β‑葡萄糖苷酶编码基因序列如SEQ ID NO:1所示，所述密码子优化的外切葡聚糖酶编码基因序列如SEQ ID NO:2所示，并且所述密码子优化的内切葡聚糖酶编码基因序列如SEQ ID NO:3所示，所述方法包括以下步骤：1)将秸秆与氯化铵以10:1‑50:1的重量比配制成培养基，灭菌；2)将所述三种工程化的解酯耶氏酵母接种于YPD液体培养基中培养，将培养得到的三种工程化的解酯耶氏酵母培养物等体积混合，离心收集菌体，用pH 5.0的磷酸缓冲液重悬，所述磷酸缓冲液的量为6mL/g秸秆；3)将步骤2)得到的重悬的工程化的解酯耶氏酵母接种于步骤1)得到的秸秆与氯化铵的混合培养基中进行发酵10‑15天，得到发酵产物。