[发明专利]一种海南黄花梨和越南黄花梨的分子鉴定方法和鉴定引物有效
申请号: | 201610231958.0 | 申请日: | 2016-04-12 |
公开(公告)号: | CN105695610B | 公开(公告)日: | 2018-02-23 |
发明(设计)人: | 涂铁要;李世晋;李永泉;朱成杰;李显强;刘俊芳;张奠湘 | 申请(专利权)人: | 中国科学院华南植物园;广东省林业科技推广总站 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司44001 | 代理人: | 刘明星 |
地址: | 510650 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种海南黄花梨和越南黄花梨的分子鉴定方法和鉴定引物。本发明方法是基于海南黄花梨和越南黄花梨之间质体基因rpoC2和petD序列差异提供的分子鉴定方法,包括待鉴定样品进行总DNA提取、PCR扩增rpoC2和petD序列以及将其测序后与海南黄花梨和越南黄花梨标准样品rpoC2和petD序列比对的步骤。该方法能准确快速的鉴定区分海南黄花梨和越南黄花梨,解决了依靠传统木材解剖手段无法鉴别二者的难题,为木材市场、商家、消费者、公安机关、海关和科研机构提供一种高效可靠的海南黄花梨和越南黄花梨鉴别方法,具有很强的应用价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 海南 花梨 越南 分子 鉴定 方法 引物 | ||
【主权项】:
一种海南黄花梨和越南黄花梨的分子鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:a、对待鉴定样品进行总DNA提取;b、PCR扩增:以步骤a提取的总DNA为模板,分别用rpoC2序列的正/反向引物和petD序列的正/反向引物进行PCR扩增,分别得到扩增产物;所述的rpoC2序列的正向引物的碱基序列如SEQ ID NO.5所示,所述的rpoC2序列的反向引物的碱基序列如SEQ ID NO.6所示,所述的petD序列的正向引物的碱基序列如SEQ ID NO.7所示,所述的petD序列的反向引物的碱基序列如SEQ ID NO.8所示;c、序列比对:将扩增产物测序,然后将测序的rpoC2序列与SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3进行比对,将测序的petD序列与SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4进行比对;如果rpoC2序列与SEQ ID NO.1一致、petD序列与SEQ ID NO.2一致,则该待鉴定样品为海南黄花梨;如果rpoC2序列与SEQ ID NO.3一致、petD序列与SEQ ID NO.4一致,则该待鉴定样品为越南黄花梨。
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