[发明专利]一种构建高通量测序文库的方法和试剂盒

摘要

本发明涉及一种构建可以同时捕获多个扩增片段的测序文库的方法和试剂盒。所述方法包括以下步骤：第一轮扩增；消化引物；第二轮扩增；纯化回收；测序；分析。本发明通过合理的引物设计和PCR策略，在PCR产物的5`末端直接添加D5接头引物和D7接头引物序列。通过对每个样本都引入可区分的标签序列，使样本在第二代高通量测序技术检测时，每个样本的测序结果都可以通过其独特的标签序列找回，可以应用于同时检测大量样本的多个不同基因位点，大大降低了测序成本。

主权项

1.一种构建包括BRCA1基因和BRCA2基因外显子区域的测序文库的试剂盒，其中，所述BRCA1基因包括23个外显子区域，以及BRCA2基因包括27个外显子区域，所述试剂盒包括：第一轮扩增引物的组合，其包括：第二轮扩增引物的组合，其包括选自由D501～D508(SEQ ID NO:1～SEQ ID NO:8)中之一和D701～D712(SEQ ID NO:9～SEQ ID NO:20)之一组成的标签引物序列的一对或多对，以使各样本可区分：