[发明专利]一种用无籽刺梨制备发酵型烟用香料的方法

摘要

本发明公开了一种用无籽刺梨制备发酵型烟用香料的方法。将无籽刺梨洗净后压榨，过滤，使汁液与残渣分离。利用果胶酶和糖化酶对无籽刺梨汁液进行酶解，同时将黄绿木霉HLMM‑04菌株制备粗酶液，发酵无籽刺梨残渣。将酶解后的汁液与发酵后的残渣混合，经回流提取、过滤除渣、减压浓缩，得无籽刺梨发酵型香料。所述黄绿木霉HLMM‑04菌株保藏号为CGMCC No.10839，具有产纤维素酶的能力。所制得的发酵型烟用香料具有明显的果香，与烟气协调性较好，具有增加烟气丰富性，改善口感的作用。

主权项

一种用无籽刺梨制备发酵型烟用香料的方法，包括以下步骤：(1)发酵菌株粗酶液制备：将黄绿木霉HLMM‑04 CGMCC No.10839菌株活化两次后，接种于装有200mL PDA液体培养基的三角瓶中，在28℃，180rpm下发酵培养5d；所述的PDA液体培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，补蒸馏水至1L，pH7.0，115℃高压灭菌15min；发酵液过滤去除菌体，取上清液缓慢加入硫酸氨至80％饱和度，4℃下静置过夜，离心收集沉淀物并溶于2mL缓冲液中，再用缓冲液进行透析，得到粗酶液备用；所述的缓冲液为：0.02mol/L Na₂HPO₄‑NaH₂PO₄，pH 7.3；(2)将无籽刺梨洗净后压榨、过滤、分离汁液与残渣；(3)将果胶酶和糖化酶按1:1的质量比混合，然后在40℃水中溶解活化，再按0.1～0.2％质量比加入无籽刺梨汁液中，40℃酶解2～4h；(4)在无籽刺梨残渣中加入两倍重量的水，混匀，加入备用的黄绿木霉HLMM‑04粗酶液进行发酵；粗酶液添加量为无籽刺梨残渣重量的5％～10％，发酵温度为40℃，发酵时间2～4h；(5)取酶解后的无籽刺梨汁液和发酵后的无籽刺梨残渣混合，回流提取3h，过滤除渣，将上清液减压浓缩，即得所需的发酵型烟用香料。