[发明专利]一种局限青霉的检测方法

摘要

本发明提供一种局限青霉的检测方法，设计了三对LAMP引物FIP、BIP、LF、LB、F3和B3，其中FIP为5’端生物素标记引物，LF为5’端异硫氰酸荧光素FITC标记探针，配制含三对引物和样品模板的LAMP反应体系步骤，对LAMP反应体系进行扩增，然后用LFD试纸条检测，并随后进行了灵敏度和特异性评价。结果显示，应用LAMP‑LFD方法对局限青霉基因组DNA检测最低检测线为4.2fg/μL；特异性验证本发明只对局限青霉(P.restrictum)呈阳性反应。

主权项

1.一种用于检测局限青霉的LAMP引物组，其特征在于，所述的引物组由以下的引物组成：F3引物，其序列为AGGGATACCCGCTGAACTT、B3引物，其序列为TCCCATACGGGATTCTCACC、FIP引物，其序列为TTGAGCTCTTGCCGCTTCACTCGCGGAGGAAAAGAAACCAAC、BIP引物，其序列为ATTTGCAGAGGATGCTTCGGGATCTATGACGGCCCGTTCC、LF引物，其序列为GCCGTTACTGGGGCAATC、LB引物，其序列为GGCCCCCATCTAAGTGCT；所述的FIP引物的5′端用生物素进行标记；所述的LF引物的5′端用FITC进行标记。