[发明专利]一种细菌人工染色体重组鸭瘟病毒拯救系统平台的构建方法及应用在审
| 申请号： | 201610244190.0 | 申请日： | 2016-04-19 |
| 公开（公告）号： | CN105802922A | 公开（公告）日： | 2016-07-27 |
| 发明（设计）人： | 吴英;汪铭书;程安春 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/66;C12N15/86 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 611130 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本申请公开了一种细菌人工染色体重组鸭瘟病毒拯救系统平台的构建方法及其应用。细菌人工染色体重组鸭瘟病毒是通过将包含TK基因左右同源臂、报告基因EGFP和细菌人工染色体核心功能元件的重组鸭瘟病毒转移载体pUC18/EGFP‑TKAB‑BAC11插入到TK区域获得。利用此平台，通过细菌内两步RED重组方法构建的UL55基因缺失株及其回复突变株与亲本株的体外生物学特性极为接近，且其功能不涉及UL26.5基因在细胞内的定位。本发明的公开有利于DPV CHv的致病机理和基因功能研究的开展；有利于基于此平台的鸭瘟病毒预防及其他禽类传染病重组鸭瘟病毒疫苗的研究及应用。此外，由于此重组病毒带有TK缺失标记和EGFP基因，还可以发展为标记疫苗在临床上区别野毒和重组疫苗毒。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 细菌 人工 染色体 重组 瘟病 拯救 系统 平台 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种重组鸭瘟病毒，其特征在于，包括鸭瘟病毒全基因组序列，所述鸭瘟病毒全基因组序列内插入了转移载体pUC18/EGFP‑TKAB‑BAC11序列，所述转移载体pUC18/EGFP‑TKAB‑BAC11序列包括细菌人工染色体核心功能元件(mini‑F序列)、筛选标记绿色荧光蛋白EGFP、Cm抗性标记和两个loxp位点；所述转移载体序列如SEQ ID NO.1所示；所述loxp位点的核苷酸序列如SEQ ID NO.24所示。
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