[发明专利]海水微生物絮凝剂DHS的制备方法

摘要

本发明公开一种海水微生物絮凝剂DHS的制备方法，利用从海岸滩涂淤泥中分离筛选出的地衣芽孢杆菌dhs‑40，接种于发酵培养基获得发酵培养液，再将发酵培养液经过离心、盐析、离心、透析、干燥，制成海水微生物絮凝剂DHS。在25～35℃、溶氧条件为20％～40％条件下，培养1～2d，获得发酵培养液。将发酵培养液经过离心获得发酵上清液，发酵上清液经过盐析后，分离获得的沉淀粗提物溶解于缓冲液，再将溶液经过盐析后喷雾干燥，获得海水微生物絮凝剂DHS。本发明制备的具有高絮凝活力的专门用于海水处理的微生物絮凝剂，絮凝效果比较理想，便于应用推广。

主权项

1.一种海水微生物絮凝剂DHS的制备方法，其特征在于：采用地衣芽孢杆菌发酵培养而成，操作步骤包括发酵培养基制备(S₁)，使用大豆油、豆粕、磷酸二氢钾、氯化钙溶液、硫酸锰溶液、硫酸亚铁溶液制备发酵培养基，培养基中大豆油浓度0.4％～0.6％、豆粕4.0～7.0g/L、磷酸二氢钾0.1～0.5g/L、氯化钙溶液20～30μL/L、硫酸锰溶液200～400μL/L、硫酸亚铁溶液50～200μL/L,其中，原料氯化钙溶液浓度为7.5g/L、原料硫酸锰溶液浓度为2.0g/L、原料硫酸亚铁溶液浓度为2.0g/L；菌种发酵培养(S₂)，将地衣芽孢杆菌dhs‑40菌种接种于发酵培养基中培养，获得发酵培养液；絮凝剂制备(S₃)，发酵培养液经高速离心获得发酵上清液，将上清液加入硫酸铵盐析、高速离心获得沉淀粗提物，再将离心分离获得的粗提物溶解缓冲液中透析后，使用喷雾干燥仪喷雾干燥获得海水微生物絮凝剂DHS，硫酸铵浓度为饱和溶液浓度60％～80％，缓冲液为10mM pH8.0 Tris‑HCl；所述地衣芽孢杆菌为从海岸滩涂淤泥中分离筛选出的地衣芽孢杆菌dhs‑40(Bacillus licheniformis dhs‑40)，己于2010年04月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏中心登记入册编号为CGMCC No.3709；所述菌种发酵培养(S₂)中，将地衣芽孢杆菌dhs‑40菌种接种于发酵培养基，在25～35℃、溶氧条件为20％～40％条件下，培养1～2d，获得发酵培养液。