[发明专利]一种细胞悬浮培养生产重组人血小板生成素的方法有效
申请号: | 201610247501.9 | 申请日: | 2016-04-20 |
公开(公告)号: | CN105838664B | 公开(公告)日: | 2020-08-04 |
发明(设计)人: | 张晖;张静;陈超 | 申请(专利权)人: | 深圳未名新鹏生物医药有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/02;C07K14/475 |
代理公司: | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 | 代理人: | 陈剑聪 |
地址: | 518000 广东省深*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提出了一种细胞悬浮培养生产重组人血小板生成素的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)驯化携带有编码人血小板生成素基因序列的CHO细胞株适应化学限定培养基,筛选获得高表达重组人血小板生成素的单克隆细胞株,并建立原始细胞库、主细胞库和工作细胞库;(2)工程细胞的悬浮培养,包括种子复苏、细胞扩增、细胞接种以及悬浮流加培养,然后收获上清液;悬浮流加培养包括添加物的优化、流加补料的筛选以及流加方法的优化。本发明培养出的细胞密度高、容易放大、生产周期短、表达量高,收获生产重组人血小板生成素发酵液。 | ||
搜索关键词: | 一种 细胞 悬浮 培养 生产 重组 血小板 生成 方法 | ||
【主权项】:
一种细胞悬浮培养生产重组人血小板生成素的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)驯化携带有编码人血小板生成素基因序列的CHO细胞株适应化学限定培养基,筛选获得高表达重组人血小板生成素的单克隆细胞株,并建立原始细胞库、主细胞库和工作细胞库;(2)工程细胞的悬浮培养,包括种子复苏、细胞扩增、细胞接种以及悬浮流加培养,然后收获上清液;悬浮流加培养包括添加物的优化、流加补料的筛选以及流加方法的优化。
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