[发明专利]一种快速区分四种血清型登革病毒的RT-PCR-HRM或PCR-HRM引物、试剂及方法有效
申请号: | 201610248324.6 | 申请日: | 2016-04-20 |
公开(公告)号: | CN105779654B | 公开(公告)日: | 2019-05-07 |
发明(设计)人: | 颜丙峰;郭鹏举;黄韧;张复春;赵令斋 | 申请(专利权)人: | 广东省实验动物监测所;广州市第八人民医院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 胡辉 |
地址: | 510000 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种快速区分四种血清型登革病毒的RT‑PCR‑HRM或PCR‑HRM引物、试剂及方法。根据四种血清型的登革病毒基因组序列比对结果,设计了三条引物,以RNA为模板加LC green染料进行一步法RT‑PCR或以构建的含登革病毒280bp碱基的质粒为模板加入LC green染料进行PCR扩增,扩增产物进行HRM分析,HRM标准曲线图与峰型图均可以明显的区分四种血清型的登革病毒。本方法操作简单、试剂成本低廉、检测灵敏度高且分型结果可靠,是一种对四种血清型登革病毒进行检测分型的创新方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 区分 血清 型登革 病毒 rt pcr hrm 引物 试剂 方法 | ||
【主权项】:
1.碱基位点在快速区分不同血清型登革病毒中的应用,所述碱基位点为:Genbank编号为EU848545.1的DV1标准株基因组中第10648位碱基G,第10671位碱基T,第10672位碱基A,第10675位碱基G;Genbank编号为AF038403.1 的DV2标准株基因组中第10638位碱基A,第10661位碱基C,第10662位碱基T,第10665位碱基G;Genbank编号为M93130.1的DV3标准株基因组中第10610位碱基G,第10633位碱基C,第10634位碱基T,第10637位碱基G;Genbank编号为AY947539.1的DV4标准株基因组中第10570位碱基A,第10593位碱基T,第10594位碱基G,第10597位碱基A;所述应用不用于疾病的诊断和治疗。
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