[发明专利]一种结肠腺瘤样息肉蛋白APC基因突变检测试剂及应用

摘要

本发明公开了一种用于结肠腺瘤样息肉蛋白（APC）基因突变检测的检测试剂、PCR检测方法及应用，属于基础生物研究及生物检测技术领域。检测试剂包括引物、肽核酸荧光探针及野生型互补的肽核酸序列，正向引物如序列表中SEQ ID NO.1、NO.3；反向引物如序列表中SEQ ID NO.2、NO.4；肽核酸荧光探针如序列表中SEQ ID NO.5、NO.6；野生型互补肽核酸序列如序列表中SEQ ID NO.7、NO.8。本发明从转录水平能快速发现Wnt信号通路中APC基因突变情况，具有特异性强、灵敏度高等显著优点，为抗癌药物筛选，新靶向药物探讨、基础科学研究提供工具。

主权项

一种检测Wnt信号通路中结肠腺瘤样息肉蛋白APC基因突变的检测试剂，其特征在于，包括用于阻断野生型APC基因扩增的野生型PNA序列、用于特异性扩增R876Q、S966G突变型APC基因序列的一组引物对及突变型PNA荧光探针：所述检测APC基因R876Q突变正向引物如序列表中SEQ ID NO.1；所述检测APC基因R876Q突变反向引物如序列表中SEQ ID NO.2；所述检测APC基因S966G突变正向引物如序列表中SEQ ID NO.3；所述检测APC基因S966G突变反向引物如序列表中SEQ ID NO.4；所述检测APC基因R876Q突变型PNA荧光探针如序列表中SEQ ID NO.5；所述检测APC基因S966G突变型PNA荧光探针如序列表中SEQ ID NO.6；所述特异性结合包含APC基因876密码子野生型PNA序列如序列表中SEQ ID NO.7；所述特异性结合包含APC基因966密码子野生型PNA序列如序列表中SEQ ID NO.8；所述PNA荧光探针的5'端的荧光报告基团为：FAM、HEX、TET、JOE、VIC、ROX、Cy3或Cy5，3'端的淬灭基团为：TAMRA、Eclipse、BHQ1、BHQ2、BHQ3或DABCYL。