[发明专利]人血型抗原P1五糖的合成方法

摘要

本发明公开了一种人血型抗原P1五糖的合成方法，包括：利用“一锅多酶”体系将半乳糖以β1‑4糖苷键偶联到式(III)所示的三糖上，合成式(IV)所示的四糖的步骤；以及利用“一锅多酶”体系将半乳糖以α1‑4糖苷键偶联到式(IV)所示的四糖上，合成式(I)所示的五糖的步骤；式(I)、式(III)和式(IV)中，R₁为羟基、叠氮取代烷基、炔基取代烷基、巯基取代烷基、α‑或β‑构型取代烷基、α‑或β‑构型丝氨酸残基、α‑或β‑构型苏氨酸残基。本发明将酶法合成所具有的高区域选择性和高效性结合到一起，并首次合成了P1抗原五糖，本发明所利用的糖基转移酶、糖核苷生成酶以及糖激酶均为原核生物来源，具有蛋白表达量高、底物适应性广泛、催化效率高等优点。

主权项

1.一种人血型抗原P1五糖的合成方法，包括：利用“一锅多酶”体系将半乳糖以β1‑4糖苷键偶联到式(III)所示的三糖上，合成式(IV)所示的四糖的步骤；以及利用“一锅多酶”体系将半乳糖以α1‑4糖苷键偶联到式(IV)所示的四糖上，合成式(I)所示的五糖的步骤；式(I)、式(III)和式(IV)中，R1为羟基、叠氮取代烷基、炔基取代烷基、巯基取代烷基、α‑或β‑构型取代烷基、α‑或β‑构型丝氨酸残基、α‑或β‑构型苏氨酸残基；其中，利用“一锅多酶”体系合成式(IV)所示的四糖的步骤中，先后用到的酶分别为：半乳糖激酶、糖核苷生成酶以及β1‑4半乳糖转移酶；其中，利用“一锅多酶”体系合成式(I)所示的五糖的步骤中，先后用到的酶分别为：半乳糖激酶、糖核苷生成酶以及α1‑4半乳糖转移酶；其中，式(III)所示的三糖是利用“一锅多酶”体系将N‑乙酰氨基葡萄糖以β1‑3糖苷键偶联到式(II)所示的乳糖苷上制备得到；式(II)中，R1为羟基、叠氮取代烷基、炔基取代烷基、巯基取代烷基、α‑或β‑构型取代烷基、α‑或β‑构型丝氨酸残基、α‑或β‑构型苏氨酸残基；所述“一锅多酶”体系先后用到的酶分别为：N‑乙酰氨基葡萄糖激酶、糖核苷生成酶以及β1‑3N‑乙酰氨基葡萄糖转移酶。