[发明专利]一种胰岛素的酶免疫测定方法有效
申请号: | 201610263735.2 | 申请日: | 2016-04-26 |
公开(公告)号: | CN105954526B | 公开(公告)日: | 2017-10-10 |
发明(设计)人: | 曹朝晖;胡小波 | 申请(专利权)人: | 南华大学 |
主分类号: | G01N33/74 | 分类号: | G01N33/74 |
代理公司: | 长沙星耀专利事务所(普通合伙)43205 | 代理人: | 许伯严 |
地址: | 421001 湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明公开了一种胰岛素的酶免疫测定方法,包括胰岛素溶液、与胰岛素溶液反应的葡萄糖溶液、氧化剂溶液、盐酸溶液、酸式滴定管和盛放混合液的容量瓶,胰岛素的酶免疫测定方法包括以下步骤溶液混合;由碘溶液得出剩余葡萄糖溶液含量,进而得出葡萄糖消耗的量,再根据葡萄糖和胰岛素的化学反应得出胰岛素的含量。该胰岛素的酶免疫测定方法检测配方简单,制作成本低,便于推广使用;根据葡萄糖消耗含量,根据其之间化学反应,能简便有效地对血液中胰岛素的浓度进行测量。 | ||
搜索关键词: | 一种 胰岛素 免疫测定 方法 | ||
【主权项】:
一种胰岛素的测定方法,其特征在于:包括胰岛素溶液、与胰岛素溶液反应的葡萄糖溶液、纯碘溶液、氢氧化钠溶液、盐酸溶液、酸式滴定管和盛放混合液的容量瓶;包括以下步骤:S1:选取纯度较高的一定量的胰岛素溶液、过量的葡萄糖溶液静置备用,S2:按容量百分比配备葡萄糖溶液并分别放入容量瓶内:0.5摩尔浓度葡萄糖溶液:1份;1摩尔浓度葡萄糖溶液:1份;1.5摩尔浓度葡萄糖溶液:1份;2摩尔浓度葡萄糖溶液:1份;2.5摩尔浓度葡萄糖溶液:1份和3摩尔浓度葡萄糖溶液:1份;S3:将静置备好的胰岛素溶液分成等量6份,然后分别加入到0.5摩尔浓度葡萄糖溶液:1份、1摩尔浓度葡萄糖溶液:1份、1.5摩尔浓度葡萄糖溶液:1份、2摩尔浓度葡萄糖溶液:1份、2.5摩尔浓度葡萄糖溶液:1份和3摩尔浓度葡萄糖溶液:1份中,用酸式滴定管取适量盐酸溶液6份,分别放入上述6组混合溶液缓缓搅拌15min,将6组混合放入到水浴锅中煮沸8min,冷却后,混合溶液均匀摇晃100‑150次重复三次C6H12O6+I2+3NaOH=C5H11O5COONa+2NaI+2H2O②,I2+2NaOH=NaIO+NaI+H2O③,NaIO+NaI+2HCl=I2+2NaCl+H2O④;S4:根据步骤S3中的反应式④盐酸溶液(HCl)的消耗分别得出6组混合液中碘溶液(I2)的剩余量进而得出碘溶液(I2)的消耗量,由反应式②碘溶液(I2)的消耗量得到反应式①中葡萄糖的剩余量;S5:根据步骤S4中,由加入总的葡萄糖量减去由反应式②得出葡萄糖剩余量得到胰岛素消耗葡萄糖量,由胰岛素消耗葡萄糖量,由反应式①得出RNH2的含量,进而计算出反应式①胰岛素含量。
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