[发明专利]一种固态发酵生产解淀粉芽孢杆菌菌剂的方法

摘要

本发明涉及一种固态发酵生产解淀粉芽孢杆菌菌剂的方法。以小麦麸皮、豆粕粉和玉米粉为主要原料制成固态发酵培养基。将配制好的培养基加水湿润在28℃～30℃静置培养7～8h，然后室温下与二氧化氯消毒剂混合进行杀菌。二氧化氯杀菌后的培养基接种解淀粉芽孢杆菌种子液进行固态发酵。发酵结束后，将固态发酵醪进行热风干燥、粉碎，即获得解淀粉芽孢杆菌菌剂，其芽孢数达到200～220亿个/g，芽孢率达到97％～99％。本发明采用二氧化氯杀菌来代替传统的高温蒸汽杀菌，时间短，效率高，大大降低多解淀粉芽孢杆菌菌剂的生产成本，减少了环境污染。

主权项

一种固态发酵生产解淀粉芽孢杆菌菌剂的方法，其特征是包括以下步骤：a、种子培养基的配制及灭菌：于1L水中，加入20～30g葡萄糖、10～20g蛋白胨、5～10g酵母粉、2～2.5硫酸铵、5.0～5.5g氯化钠、4.0～4.5g磷酸二氢钾、1.8～2.0g碳酸钙，按照所述配比，将各种成分称重后加入三角瓶中，室温下搅拌均匀，制得种子培养基；用8层纱布密封后放入高压灭菌锅中，115℃～121℃灭菌15～20min，灭菌后把三角瓶冷却至室温；b、种子液的制备：挑取斜面保藏的解淀粉芽孢杆菌B3菌种2～3环，接种到步骤a中所述的种子培养基中，30℃、180～200rpm摇床振荡培养12～14h；c、固态发酵培养基的预处理：100g固态发酵培养基由70～80g小麦麸皮、15～20g豆粕粉、5～10g玉米粉组成；按照上述重量配比，将小麦麸皮、豆粕粉、玉米粉混合均匀，即为固态发酵培养基；向1000g固态发酵培养基中，加入200～250mL自来水，混合均匀，使其呈湿润状态，放置于培养箱中28℃～30℃静置培养7～8h；d、二氧化氯消毒液的配制：将2～3片二氧化氯消毒泡腾片加入到1L水中，待泡腾片完全溶解，并用0.2M盐酸调整其pH值为6.0～6.2，即制成浓度为240～360mg/L二氧化氯消毒液；e、固态发酵培养基的杀菌：向步骤c所述的1000g固态发酵培养基中，加入4～5g磷酸二氢钾、氯化钾2.5～3g、氯化钠5.0～6g，混匀后转移到带有机械搅拌桨的卧式不锈钢固态发酵罐中，再加入350～400mL步骤d所述的二氧化氯消毒液，室温下搅拌均匀，静置杀菌15～20min；f、固态发酵：开动机械搅拌桨搅拌步骤e的固态发酵培养基8～10min，其目的是将培养基中残存的二氧化氯释放出来，以免在后续的培养中损伤解淀粉芽孢杆菌细胞，然后，将步骤b所述解淀粉芽孢杆菌B3以4％～5％接种量接种到搅拌后的固态发酵培养基中，控制发酵温度30～34℃，每8h搅拌一次，每次搅拌8～10min，发酵96～100h，得固态发酵醪。g、干燥：采用60℃～70℃热风将步骤f所述的固态发酵醪干燥含水量30％以下。h、粉碎：使用锤式粉碎机将步骤g所述的干燥后的固态发酵醪粉碎成60～70目的粉末，即获得解淀粉芽孢杆菌B3菌剂，将解淀粉芽孢杆菌B3菌剂包装后，存放在阴凉干燥处。