[发明专利]一种断奶仔猪用复合微生态制剂的生产方法

摘要

本发明公开了一种以凝结芽孢杆菌和植物乳杆菌的混合微生物发酵，来生产饲用微生态制剂替代抗生素物的生产方法。属于微生物发酵技术领域。方法包括(1)凝结芽孢杆菌的种子液培养；(2)凝结芽孢杆菌的有氧固体发酵；(3)植物乳杆菌的种子液培养；(4)凝结芽孢杆菌和植物乳杆菌混合固体发酵等步骤、工艺。本发明利用在生产凝结芽孢杆菌的同时生产植物乳杆菌，而且采用不灭菌的生料混合发酵方法，显著降低了产品的生产成本，可推动该产品在畜禽、水产等饲料中的应用。

主权项

一种断奶仔猪用复合微生态制剂的生产方法，该方法按以下步骤进行：(1)保藏号为ACCC No.00403菌株的凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)液体种子培养：将凝结芽孢杆菌斜面菌种接入三角瓶培养基中,500ml三角瓶培养基装量为100ml，经35～38℃，180～200rpm摇床培养14～18h后成为三角瓶液体种子，备用；所述三角瓶的种子培养基为(g/L)：乳糖1,蛋白胨1,牛肉浸膏0.5,氯化钠0.5，调pH为7.0～7.5，121℃灭菌15min；(2)凝结芽孢杆菌有氧固体发酵培养：固体发酵培养基为豆粕，加豆粕重量0.6倍的水配制而成,将步骤(1)每瓶三角瓶液体种子按每瓶种子∶以固形物重量计的20～30公斤豆粕的比例接种，无需灭菌，装入曲盘至发酵物料厚度为5～7cm后，于35～38℃室温条件下发酵培养20～24h，备用；(3)保藏号为ACCC No.11016菌株的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的种子液培养：在500ml三角瓶中装入300ml液体MRS培养基，接入植物乳杆菌菌种，经35～38℃培养12～14h后，于0～4℃保存，备用；所述MRS培养基为(g/L)：葡萄糖2,蛋白胨1,牛肉浸膏1,酵母浸膏0.5,磷酸氢二钾0.2,柠檬酸二铵0.2,乙酸钠0.5，吐温0.1,硫酸镁0.058,硫酸锰0.025,调pH为5.8～6.2，121℃灭菌15min；(4)凝结芽孢杆菌和植物乳杆菌混合固体发酵：混合固体发酵培养基为：脱脂米糠∶步骤(2)凝结芽孢杆菌有氧固体发酵培养物(按发酵前豆粕重量计)∶碳酸钙按重量份70～90∶10～30∶4～10 比例配制而成，并按该发酵培养基中脱脂米糠的重量的0.5～0.7倍加入自来水，无需灭菌，将步骤(3)的植物乳杆菌种子液，按该混合发酵培养基中脱脂米糠的重量的1％～3％接种，拌匀，直接转入塑料袋中，扎紧塑料袋，尽量赶走袋中的空气，继续在35～38℃培养条件下培养30～36h后停止发酵；在不高于50℃条件下将发酵物烘干、粉碎成40目后，检验、包装成产品。