[发明专利]一种水稻秸秆固氮解磷解钾抗虫富硒有机微生物液肥

摘要

一种水稻秸秆固氮解磷解钾抗虫富硒有机微生物液肥，是将水稻秸秆发酵熬煮浓缩液、蛹虫草菌丝发酵熬煮浓缩液、水稻秸秆固氮菌液、水稻秸秆解磷解钾菌液、水稻秸秆抗虫菌液等量或不等量混匀配制而成。优点：变废为宝，满足作物对各种养分需求的同时，富含大量功能微生物及有机态硒，促进作物生长、代谢及抗虫害能力，增强土壤养分自我积累及提高作物品质。

主权项

一种水稻秸秆固氮解磷解钾抗虫富硒有机微生物液肥，其特征在于制备方法为：1）制备水稻秸秆发酵熬煮浓缩液（1）制备水稻秸秆发酵菌种液A）制备菌种培养基a、制备A液体培养基：将土豆80‑120g、水稻秸秆粉18‑22g加水900‑1100ml置于密闭容器内，加热排除冷空气后维持110‑130℃、0.5‑1小时，冷却后再加入红糖4‑6g、补足水量，混匀，100℃蒸汽灭菌0.5‑1小时，制得A液体培养基；b、制备B液体培养基：将水稻秸秆粉80‑120g加水900‑1100ml置于密闭容器内，加热排除冷空气后维持110‑130℃、0.5‑1小时，冷却后再加入(NH₄)₂SO₄ 2‑3g、(NH₄)₃PO₄ 2‑3g、补足水量，混匀，100℃蒸汽灭菌0.5‑1小时，制得B液体培养基； c、制备C液体培养基：将红糖38‑42g、(NH₄)₂SO₄ 18‑22g和水900‑110ml混匀，并以石灰水调节pH值，pH值为6.5‑7.5, 100℃蒸汽灭菌0.5‑1小时，制得C液体培养基； d、制备D液体培养基：将水稻秸秆粉8‑12g加水900‑110ml置于密闭容器内，加热排除冷空气后维持110‑130℃、0.5‑1小时，冷却后再加入红糖38‑42g、(NH₄)₂SO₄ 18‑22g、补足水量，混匀，并以石灰水调节pH值，pH值为6.5‑7.5，100℃蒸汽灭菌0.5‑1小时，制得D液体培养基； B）制备各菌种菌株的菌种液a、将绿色木霉菌种活化，无菌接入A液体培养基，转速160‑200r/min、25‑40℃摇床培养5‑7日，至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入B液体培养基，转速160‑200r/min、25‑40℃培养7‑8日，至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上；b、将米曲霉菌种活化，无菌接入A液体培养基，转速160‑200r/min、25‑40℃摇床培养5‑7日，至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入B液体培养基，转速160‑200r/min、25‑40℃培养7‑8日，至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上；c、将草酸青霉菌种活化，无菌接入A液体培养基，转速160‑200r/min、25‑40℃摇床培养5‑7日，至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入B液体培养基，转速160‑200r/min、25‑40℃摇床培养7‑8日，至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上； d、将美味丝葚霉菌种活化，活化后无菌接入C液体培养基，转速160‑200r/min、25‑40℃培养4‑5日，至发酵液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入D液体培养基，转速160‑200r/min、25‑40℃摇床培养4‑5日，至发酵液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长并菌丝生物量达500 mg/100ml以上； e、将黄色短杆菌菌种活化，活化后无菌接入C液体培养基，转速160‑200r/min、25‑40℃摇床培养1‑2日，至菌液浑浊、颜色改变；继续无菌接入D液体培养基，转速160‑200r/min、25‑40℃摇床培养1‑2日，至发酵液浑浊、颜色改变，并经细胞平板涂抹计数达5×10⁸/ml以上；C）制备水稻秸秆发酵菌种液将上述培养的绿色木霉、米曲霉、草酸青霉、美味丝葚霉和黄色短杆菌的菌种液等量混合，即为水稻秸秆发酵菌种液；（2）制备水稻秸秆发酵熬煮浓缩液A）原料重量份配比水稻秸秆发酵菌种液15‑20 水稻秸秆100 红糖3‑5公斤 水200‑250 (NH₄)₂SO₄ 10‑15 (NH₄)₃PO₄ 10‑15 KH₂PO₄ 5‑10 MgCl₂ 5‑10 FeSO₄ 3‑5MnCl₂ 3‑5 ZnSO₄ 3‑5 NaSeO₃ 0.5‑1；B）制备方法a）水稻秸秆发酵将水稻秸秆粉粹为1‑2cm小段，以2.8‑3.2%石灰水浸泡12‑24小时后捞出，放入发酵罐中，同时按原料配比加入水、红糖、水稻秸秆发酵菌种液，及1/2配方用量的(NH₄)₂SO₄ 、KH₂PO₄、MgCl₂ 、FeSO₄、MnCl₂、ZnSO₄、NaSeO₃，30‑40℃、气驱搅拌发酵7‑8日，至可见发酵罐内菌丝大量生长；继续加入另1/2的用量(NH₄)₂SO₄ 、KH₂PO₄、MgCl₂ 、FeSO₄、MnCl₂、ZnSO₄、NaSeO₃，30‑40℃、气驱搅拌发酵5‑6日，至发酵液中可见大量菌丝、秸秆明显减少且腐软、检测有机氮含量≥2.0g/100ml时，即完成水稻秸秆发酵；b）熬煮发酵完成后，将发酵液转移至密闭加热容器，加热排除冷空气后继续加热至110‑130℃、搅拌、熬煮20‑24小时，至秸秆及菌丝完全溶解，即为水稻秸秆发酵熬煮液；c）浓缩将水稻秸秆发酵熬煮液100公斤转移至敞开加热容器内，继续文火加热并维持微沸腾、搅拌、熬煮2‑4小时，使液体浓缩至30‑35公斤，即为水稻秸秆发酵熬煮浓缩液；2）制备水稻秸秆蛹虫草菌丝熬煮浓缩液A)制备蛹虫草菌种液a) 制备E液体培养基:将去皮土豆80‑120 g、蚕蛹粉8‑12g加水900‑1100ml煮至沸腾继续文火维持沸腾0.5‑1小时，冷却后再加入红糖14‑16g、水稻秸秆发酵熬煮液80‑120g、补足水量1000ml，混匀，以1mol/L盐酸调节pH值为6.0‑6.5，100℃蒸汽灭菌0.5‑1小时，制得E液体培养基；b) 制备F液体培养基: 将水稻秸秆发酵熬煮液180‑220g和水900‑1100ml混匀，并通过加入1mol/L盐酸调节pH值为6.0‑6.5，100℃蒸汽灭菌0.5‑1小时，制得F液体培养基；c)将蛹虫草菌种活化，无菌接入到E液体培养基，转速160‑200r/min、20‑25℃摇床培养4‑5日，至发酵液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；d)菌丝大量生长后，继续无菌接入F液体培养基，转速160‑200r/min、20‑25℃培养4‑5日，至发酵液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长，菌丝生物量达500mg/100ml以上，即为蛹虫草菌种液；B)制备水稻秸秆蛹虫草菌丝发酵熬煮浓缩液将100公斤水稻秸秆发酵熬煮液加入到专用发酵罐中，加入蛹虫草菌种液4‑6公斤，20‑25℃气驱搅拌培养5‑7日，至发酵液粘稠、出现大量菌丝且菌丝生物量达750‑850mg/100ml以上，结束发酵；发酵完成后，将发酵液转移至密闭加热容器内，加热排除冷空气后继续加热至100‑120℃，搅拌、熬煮3‑4小时，至菌丝完全溶解；菌丝完全溶解后，继续转移至敞开加热容器内，文火加热并维持微沸腾2‑4小时，使液体浓缩至30‑35公斤，即为水稻秸秆蛹虫草菌丝发酵熬煮浓缩液；3）制备水稻秸秆固氮菌液A) 制备G液体培养基将蛋白胨4‑6g、水稻秸秆发酵熬煮液80‑120g、水900‑1100ml混合，100℃蒸汽灭菌0.5‑1小时，制得G液体培养基；B) 制备H液体培养基将水稻秸秆发酵熬煮液480‑520g、水900‑1100ml混合，100℃蒸汽灭菌0.5‑1小时，制得H液体培养基；C) 制备水稻秸秆固氮菌种液将蜡样芽胞杆菌、阿氏芽孢杆菌、嗜糖假单胞杆菌、固氮菌菌种进行活化，分别无菌接入G液体培养基, 转速160‑200r/min、25‑35℃摇床培养1‑2日，至菌液浑浊，继续无菌接入H液体培养基, 160‑200r/min、25‑35℃摇床培养1‑2日，至各菌种菌株菌液浑浊，且经细胞平板计数达5×10⁸/ml以上，即为各菌株菌种液；再将各菌株菌种液等量混合, 即为水稻秸秆固氮菌种液；D) 制备水稻秸秆固氮菌液将水稻秸秆发酵熬煮液100公斤加入到专用发酵罐中，并加入水稻秸秆固氮菌种液4‑6公斤,气驱搅拌发酵,25‑40℃培养1‑2日，至细胞计数达5×10⁸/ml以上，即为水稻秸秆固氮菌液；4)制备水稻秸秆解磷解钾菌液A) 制备I液体培养基将蛋白胨4‑6 g、水稻秸秆发酵熬煮液80‑120g、磷矿粉8‑12g、钾长石粉4‑6g、水900‑1100ml混匀, 100℃蒸汽灭菌0.5‑1小时，制得I液体培养基； B) 制备J液体培养基将水稻秸秆发酵熬煮液480‑520g、磷矿粉8‑12g、钾长石粉4‑6g、水900‑1100ml混匀, 100℃蒸汽灭菌0.5‑1小时，制得J液体培养基；C) 制备解磷解钾菌株菌种液将枯草芽胞杆菌、芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌进行活化，分别无菌接入I液体培养基, 转速160‑200r/min、25‑35℃摇床培养1‑2日，当各菌株大量生长、菌液浑浊，进一步分别无菌接入J液体培养基, 转速160‑200r/min、25‑35℃摇床培养1‑2日，至各菌株菌液浑浊、细胞计数达5×10⁸/ml以上，即为各解磷解钾菌株菌种液；D) 制备水稻秸秆解磷解钾菌液a）原料配比水稻秸秆发酵熬煮液80‑120公斤、磷矿粉1‑3公斤、钾长石粉0.5‑2公斤；b）制备方法在各专用发酵罐中，按照配方加入水稻秸秆发酵熬煮液、磷矿粉、钾长石粉，再分别加入各解磷解钾菌株菌种液4‑6公斤，并气驱搅拌、25‑40℃发酵8‑10日，至各菌株细胞计数达5×10⁸/ml以上，即为各相应菌株水稻秸秆解磷解钾菌液；将各菌株菌液等量混合，即为水稻秸秆解磷解钾菌液；5）制备水稻秸秆抗虫菌液A）制备抗虫菌种液a、制备K液体培养基将蛋白胨4‑6 g、水稻秸秆发酵熬煮液80‑120g、水900‑1100ml混匀，100℃蒸汽灭菌0.5‑1小时，制得K液体培养基；b、制备L液体培养基水稻秸秆发酵熬煮液480‑520g、水900‑1100ml混匀，100℃蒸汽灭菌0.5‑1小时，制得L液体培养基；c、将苏云金芽孢杆菌进行活化，无菌接入K液体培养基，转速160‑200r/min、25‑35℃摇床培养1‑2日，至菌液浑浊；继续无菌接入L液体培养基，转速160‑200r/min、25‑35℃摇床培养1‑2日，至菌液浑浊且细胞计数达5×10⁸/ml以上，即为抗虫菌种液；B）制备水稻秸秆抗虫菌液在专用发酵罐中，加入水稻秸秆发酵熬煮液100公斤及抗虫菌种液4‑6公斤，25‑35℃气驱搅拌发酵1‑2日，至菌株大量生长、平板计数达1×10⁹/ml以上，即为水稻秸秆抗虫菌液；6）制备水稻秸秆固氮解磷解钾抗虫有机微生物液肥将水稻秸秆发酵熬煮浓缩液、蛹虫草菌丝熬煮浓缩液、水稻秸秆固氮菌液、水稻秸秆解磷解钾菌液、水稻秸秆抗虫菌液等量或不等量混匀,即为水稻秸秆固氮解磷解钾抗虫富硒有机微生物液肥。