[发明专利]一种游离DNA文库构建方法以及游离DNA中低频突变的检测方法有效
| 申请号： | 201610273808.6 | 申请日： | 2016-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN105821481B | 公开（公告）日： | 2019-03-19 |
| 发明（设计）人： | 田埂 | 申请（专利权）人： | 元码基因科技（苏州）有限公司 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C12Q1/6869;C12Q1/6883;C12Q1/6886 |
| 代理公司： | 北京布瑞知识产权代理有限公司 11505 | 代理人： | 张丹 |
| 地址： | 215100 江苏省苏州市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种游离DNA的文库构建方法，在单链游离DNA的3’端连接唯一序列标签，其中，唯一序列标签由随机序列和接头序列组成；加入PCR扩增用上游引物和下游引物进行PCR扩增，其中，上游引物为针对目标低频突变设计的引物，下游引物为与接头序列对应的引物。此外，本发明还涉及一种游离DNA中低频突变的检测方法，在单链游离DNA的3’端连接唯一序列标签，加入PCR扩增用上游引物和下游引物进行PCR扩增，上游引物和下游引物的一端分别与测序标签连接，将扩增后的DNA在Illumina平台上上机测序。本发明方法能够简单、高效的实现对cfDNA低频突变的检测，并可通过对cfDNA的检测，达到对胎儿遗传或者肿瘤细胞突变检测的目的。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 游离 dna 文库 构建 方法 以及 低频 突变 检测 | ||
【主权项】：
1.一种游离DNA文库的构建方法，包括以下步骤：(1)在单链游离DNA的3’端连接唯一序列标签，所述唯一序列标签由随机序列和接头序列组成；(2)加入PCR扩增用上游引物和下游引物进行PCR扩增，所述上游引物为针对目标低频突变设计的引物，所述下游引物为与接头序列对应的引物。
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