[发明专利]一种改良的NK细胞培养方法在审

专利信息
申请号: 201610277828.0 申请日: 2016-04-28
公开(公告)号: CN105907714A 公开(公告)日: 2016-08-31
发明(设计)人: 王晓冰 申请(专利权)人: 王晓冰
主分类号: C12N5/0783 分类号: C12N5/0783;A61K35/17;A61P35/00
代理公司: 上海申新律师事务所 31272 代理人: 竺路玲
地址: 201600 上海市松江*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明公开了一种改良的NK细胞培养方法,本发明的培养方法分离培养的NK细胞的数量足,扩增快,一般外周血培养15天,能够达到70亿个细胞;本发明通过培养基中添加乙酰化α葡聚糖作为激活调动剂,成功激活了NK细胞,促使其分泌IL2、IL12和IFN‑γ,而IL2、IL12和IFN‑γ在NK细胞活化后维持其活性和扩增速率起到关键的作用,使其更具有临床应用价值;此外,本发明方法获得NK细胞的纯度高,对流式细胞仪的检测结果进行分析,发现CD3CD56+的NK细胞数达到80%以上,满足临床应用的要求。
搜索关键词: 一种 改良 nk 细胞培养 方法
【主权项】:
一种改良的NK细胞培养方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:用PBS稀释单克隆抗体CD16和CD2获得抗体稀释液,然后用抗体稀释液过夜包被细胞培养容器;步骤2:分离单个核细胞;步骤3:将步骤2获得的单个核细胞接种到培养容器中,从接种时间开始计时,每隔3天更换新鲜的细胞培养基,培养18天后收集细胞;所述的细胞培养基中含有乙酰化α葡聚糖。
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