[发明专利]一种改良的PPCs细胞培养方法在审

专利信息
申请号: 201610277851.X 申请日: 2016-04-28
公开(公告)号: CN106434550A 公开(公告)日: 2017-02-22
发明(设计)人: 王晓冰 申请(专利权)人: 王晓冰
主分类号: C12N5/078 分类号: C12N5/078;A61K35/14;A61P39/00
代理公司: 上海申新律师事务所31272 代理人: 竺路玲
地址: 201600 上海市松江*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明公开了一种改良的PPCs细胞培养方法,包括以下步骤:步骤1:使用明胶稀释液过夜包被培养容器;步骤2:分离单个核细胞,然后洗涤、离心和重悬后分装备用;步骤3:将所述步骤1处理的培养容器内的多余明胶吸除,并将步骤2中获得的单个核细胞接种到培养容器中,放置于氧浓度为1%‑5%的细胞培养箱中培养,从接种时间开始计时,每隔3天更换新鲜的细胞培养基,培养12天后收集细胞。培养细胞所使用的培养基中一半体积为成纤维细胞的细胞上清液,另一半体积为包含有10ng/ml SCF等的DMEM/F12培养基。本发明的培养方法对人体损伤较小,可以多次实施,同时分离得到的PPCs细胞活率高、增值快。
搜索关键词: 一种 改良 ppcs 细胞培养 方法
【主权项】:
一种改良的PPCs细胞培养方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:使用明胶稀释液过夜包被培养容器;步骤2:分离单个核细胞,然后洗涤、离心和重悬后分装备用;步骤3:将所述步骤1处理的培养容器内的多余明胶吸除,并将步骤2中获得的单个核细胞接种到培养容器中,放置于氧浓度为1%‑5%的细胞培养箱中培养,从接种时间开始计时,每隔3天更换新鲜的细胞培养基,培养12天后收集细胞。
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