[发明专利]双顺反子表达载体及其构建方法与应用在审
| 申请号： | 201610284371.6 | 申请日： | 2016-05-03 |
| 公开（公告）号： | CN107338267A | 公开（公告）日： | 2017-11-10 |
| 发明（设计）人： | 万晓春;李俊鑫;刘绿艳;任晓虎;周启明 | 申请（专利权）人： | 中国科学院深圳先进技术研究院;深圳先进技术研究院;深圳市疾病预防控制中心;深圳市南山区人民医院 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/66 |
| 代理公司： | 北京三友知识产权代理有限公司11127 | 代理人： | 韩蕾,姚亮 |
| 地址： | 518055 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种双顺反子表达载体及其构建方法与应用，具体是一种用来高效、稳定转染二氢叶酸还原酶营养缺陷型突变CHO细胞株(CHO/dhfr‑)的双顺反子表达载体，其是在pIRES质粒上分别插入S100a6启动子、目的基因和dhfr基因构建而成。本发明通过使用低温诱导型启动子和构建双顺反子载体，弱化dhfr基因的表达，使目的基因仅仅通过两或三轮的加压筛选，在低浓度MTX下获得足够的拷贝数，同时利用诱导启动子的性质，在生产过程中降低温度，最大限度增加重组蛋白的产量。 | ||
| 搜索关键词： | 顺反子 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种双顺反子表达载体，其是在pIRES质粒上分别插入S100a6启动子、目的基因和dhfr基因构建而成。
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