[发明专利]一种Fbxo40基因敲除猪的制备方法有效

专利信息
申请号: 201610285534.2 申请日: 2016-04-29
公开(公告)号: CN105821049B 公开(公告)日: 2019-06-04
发明(设计)人: 李秋艳;邹云龙;李宁;赵要风;李志远;付怡静;郝海阳 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: C12N15/12 分类号: C12N15/12;C12N15/113;C12N15/85;C12N15/873;A01K67/027
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明提供了一种Fbxo40基因敲除猪的制备方法。本发明将CRISPR/Cas9打靶载体及PGK‑Neo抗性基因共同转染猪胎儿成纤维细胞,获得G418抗性的阳性单克隆细胞,阳性单克隆细胞中的Fbxo40基因发生插入/缺失突变、且读码框产生移码并提前终止,将这样的细胞克隆作为核移植的供体细胞,以卵母细胞作为核移植的受体卵母细胞,通过体细胞核移植技术获得克隆胚胎,将优质的克隆胚胎移植到发情母猪输卵管内,通过全期发育并获得Fbxo40基因敲除的克隆猪。本发明利用CRISPR/Cas9的基因编辑技术,低成本、高效率地获得了Fbxo40敲除猪,为研究肌肉发育及肌肉相关疾病提供了动物模型。
搜索关键词: 一种 fbxo40 基因 制备 方法
【主权项】:
1.猪Fbxo40基因第三外显子在制备Fbxo40基因敲除猪中的用途,所述猪Fbxo40基因第三外显子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
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