[发明专利]一种对基因启动子进行定向进化的方法有效
申请号: | 201610286967.X | 申请日: | 2016-05-03 |
公开(公告)号: | CN107338241B | 公开(公告)日: | 2022-02-11 |
发明(设计)人: | 万晓春;李俊鑫;刘绿艳;吴高慧 | 申请(专利权)人: | 中国科学院深圳先进技术研究院;深圳先进技术研究院;深圳市罗湖区人民医院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12N15/113 |
代理公司: | 北京三友知识产权代理有限公司 11127 | 代理人: | 韩蕾;姚亮 |
地址: | 518055 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提供了一种对基因启动子进行定向进化的方法,该方法包括:用易错PCR技术扩增启动子,获得一组突变频率较高的启动子序列;用DNA改组技术去除有害突变,集合有益突变,获得改组的启动子;重组启动子和半乳糖苷酶基因组成表达盒转化宿主细胞,通过蓝白斑筛选和酶活测定获得目标突变启动子。本发明的方法不需要分析基因启动子的功能区域,成本低,高效快捷,操作简便,成功率高,适合于对大肠杆菌或其他细菌、真菌和哺乳动物细胞的基因启动子定向进化。 | ||
搜索关键词: | 一种 基因 启动子 进行 定向 进化 方法 | ||
【主权项】:
一种对基因启动子进行定向进化的方法,该方法包括:用易错PCR技术扩增启动子,获得一组突变的启动子序列;用DNA改组技术去除有害突变,集合有益突变,获得改组的启动子;将重组启动子和半乳糖苷酶基因组成表达盒转化宿主细胞,通过蓝白斑筛选和酶活测定获得目标突变启动子。
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