[发明专利]一种表面等离子体共振传感芯片及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种表面等离子体共振传感芯片及其制备方法和应用。该制备方法包括：(1)清洗玻璃基片后烘干；(2)制备铬膜，再在铬膜上制备金膜，得裸金芯片；(3)滴加含改性牛血清白蛋白的溶液，使铺满整个芯片，继续滴加直至浸泡整个芯片，密封振荡反应0.5～2小时后清洗干燥；(4)滴加NHS和EDC的混合溶液，使铺满整个芯片，继续滴加直至浸泡整个芯片，密封振荡反应15分钟～1小时后清洗干燥；(5)滴加溴乙酸溶液，使铺满整个芯片，继续滴加直至浸泡整个芯片，密封振荡反应8～24小时后清洗干燥，得空白芯片。本发明的制备方法只需2天即可完成，且得到的芯片比传统葡聚糖芯片(需要5天制备)具有更好的均匀性。

主权项

1.一种表面等离子体共振传感芯片的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)清洗玻璃基片：依次以浓硫酸和去离子水煮洗玻璃基片，烘干；(2)采用溅射或沉积的方法，在玻璃基片上制备出厚度为10nm的铬膜，然后在铬膜上面制备厚度为45‑55nm的金膜，该金膜作为表面等离子体共振传感芯片的固相载体，制得裸金芯片；(3)在裸金芯片上滴加含改性牛血清白蛋白的溶液，使溶液均匀铺满整个芯片，继续滴加直至浸泡整个芯片，密封振荡反应，采用自组装的方式对金膜表面进行化学修饰，室温反应0.5小时，然后清洗和干燥芯片；其中，所述改性牛血清白蛋白采用改性试剂与普通牛血清蛋白进行混合反应制得，改性试剂包括二硫苏糖醇、三(2‑羧乙基)膦或β‑巯基乙醇，所述改性试剂的浓度为0.01～0.1g/L，所述普通牛血清白蛋白的浓度为1～20g/L，所述混合反应的溶液中含有0.5％～2％的NaCl，室温反应0.5～2小时，即获得所述改性牛血清白蛋白；(4)滴加NHS和EDC的混合溶液，使溶液均匀铺满整个芯片，继续滴加直至浸泡整个芯片，密封振荡反应，使得金膜表面上固定的改性牛血清白蛋白进行化学交联反应，室温反应15分钟，然后清洗和干燥芯片；(5)滴加溴乙酸溶液，使溶液均匀铺满整个芯片，继续滴加直至浸泡整个芯片，密封振荡反应，使得交联的改性牛血清白蛋白羧甲基化，室温反应8小时，然后清洗和干燥芯片，即制得空白芯片；(6)继续执行包括如下子步骤的步骤：a’)将空白芯片安装在表面等离子体共振生化分析仪上，固定配套流通池；b’)流动通入NHS和EDC的混合溶液，使得金膜表面上固定的改性牛血清白蛋白进行化学交联反应，室温反应7分钟，然后用PBS缓冲液流动清洗；c’)流动通入以醋酸缓冲液为溶剂的小分子偶联物溶液，室温反应10分钟，然后用PBS缓冲液流动清洗；d’)流动通入乙醇胺溶液，然后用PBS缓冲液流动清洗，即制得在线固定的小分子检测芯片。