[发明专利]一种蔬果中烯酰吗啉与赤霉素残留量测定的方法

摘要

本发明涉及一种蔬果中烯酰吗啉与赤霉素残留量测定的方法。本发明蔬果中烯酰吗啉与赤霉素残留量的测定方法包括：样品制备；样品前处理；有机溶剂提取；固相萃取小柱去除色素杂质，氮气吹至近干，以流动相溶解残渣，溶液经滤膜过滤供HPLC分析；标准溶液的配制；高效液相色谱仪测定等过程。本发明的方法，操作简单，快速，自动化程度高，萃取效率快，回收率和重复性好，可实现蔬果中烯酰吗啉与赤霉素残留量的同时测定。

主权项

1.一种蔬果中烯酰吗啉与赤霉素残留量测定的方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）样品制备：将蔬果样品绞碎、匀浆，冷冻保存，得冷冻样品；（2）样品前处理：称取10g冷冻样品，精确到0.01g，置于50mL离心管中，加入10 mL 80%甲醇水混匀，涡旋，2 min；振荡，10 min；4℃，8000 r/min离心，提取上清液；再加入10 mL80%甲醇水，涡旋，2 min；振荡，10 min；4℃，8000 r/min离心，提取上清液；合并两次提取液，浓缩至4 mL，得浓缩液；用2 mol/L盐酸调节上述4 mL浓缩液的pH至2.5，加入15mL乙酸乙酯，涡旋，2min；振荡，10min；4℃，8000 r/min离心，提取有机相；再加入15 mL乙酸乙酯，涡旋，2min；振荡，10min；4℃，8000 r/min离心，提取有机相；合并两次有机相提取液；将两次有机相提取液在45℃，旋转、浓缩至近干，加入2.0mL正己烷溶解残渣，得待净化溶液；将酸性氧化铝柱依次用5mL的丙酮+正己烷混合液、5mL正己烷预淋洗、条件化，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即倒入上述待净化溶液，用15mL刻度离心管接收洗脱液，用5mL的丙酮+正己烷混合液冲洗烧杯后，洗脱酸性氧化铝柱，并重复一次；将盛有10mL洗脱液的刻度离心管置于氮吹仪上，在水浴温度50℃条件下，氮气吹干，用超纯水定容至1.0mL，在旋涡混合器上混匀，经0.45μm滤膜过滤，供高效液相色谱测定；（3）标准溶液的配制：混合标准工作液用乙腈稀释，配制成具有系列梯度浓度的混合标准工作液，以超纯水定容；（4）高效液相色谱仪测定：将工作液注入配有紫外检测器的高效液相色谱仪器中，进行高效液相色谱测定；高效液相色谱测定条件如下：C18柱，150 mm×4.6 mm×5 μm；流动相：甲醇+水+乙酸水溶液，乙酸水溶液pH=4.0；流速：1.0 mL/min；柱温：40℃；进样量：20 μL；紫外吸收波长：252 nm；所述流动相梯度及时间如下表，其中A为甲醇，B为水，C为乙酸水溶液：（5）残留量测定结果的计算：以保留时间对烯酰吗啉、赤霉素两种农药进行定性分析，以峰面积进行两种农药的定量分析，用外标法计算结果。