[发明专利]一种脱细胞肌腱或韧带支架的制备方法

摘要

本发明涉及一种脱细胞肌腱或韧带支架的制备方法。目的在于提供一种具备良好的生物力学特性和生物相容性的脱细胞肌腱或韧带胶原纤维材料。获取去除外膜和滑膜组织的动物肌腱或韧带，脱细胞过程中全程使用含有韧带或肌腱支架结构保护剂的混合保护液；采用高静压技术预分离韧带或肌腱组织内的细胞；采用复合核酸酶方法消化残余细胞核；利用去垢剂脱除松散破碎细胞片；使用混合保护液进行漂洗。本发明通过高效的物理，少量的酶和去垢剂脱的方法充分去除韧带或肌腱中的细胞成分，并应用保护液的全程保护，以保证细胞核脱净的基础上，最大限度地降低肌腱或韧带组织的免疫原性的同时保留了其正常胶原纤维的三维结构及排列极性。

主权项

1.一种脱细胞肌腱或韧带支架材料的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)取动物肌腱或韧带，清除其表面的外膜和滑膜组织；(2)全程使用包含一种或多种保护肌腱或韧带功能和组织完整性的混合保护液；(3)使用高静压预分离肌腱或韧带内的细胞；(4)采用复合核酸酶去除破碎细胞核；(5)利用去垢剂脱除松散破碎细胞；(6)在肌腱或韧带混合保护液中漂洗去除多余的核酸酶和细胞碎片；(7)获得具有正常胶原纤维的三维结构及排列极性的带有生物特性的脱细胞肌腱或韧带；其中所述混合保护液成分组成为：RPMI‑1640培养基；硫酸软骨素的浓度为20‑60g/L；透明质酸的浓度为10‑50g/L；右旋糖酐的浓度为10‑20g/L；妥布霉素5‑8.5mg/L，调节pH值至6.8‑7.2之间，渗透压为400‑500mOsm；所述高静压压力条件为500‑800MPa，高静压频率为3‑8次，每次为5～8分钟。