[发明专利]一种控制人神经细胞重编程的信号通路及其应用

摘要

本发明公开了一种控制人神经细胞重编程的信号通路及其应用。所述nPTB‑BRN2‑miR‑9信号通路为：nPTB的下调诱导BRN2活化；被激活的BRN2上调miR‑9；miR‑9下调nPTB。该应用为一种诱导神经细胞成熟的方法，包括如下步骤：激活未成熟的神经细胞中的nPTB‑BRN2‑miR‑9信号通路。本发明的信号通路、以及激活信号通路的方法和物质在制备神经类疾病,特别是神经退行性疾病和脑肿瘤的药物中具有重要应用价值。

主权项

1.一种将人体细胞重编程得到成熟神经细胞的方法，包括如下步骤：（1）将人体细胞重编程得到未成熟的神经细胞；所述将人体细胞重编程得到未成熟的神经细胞的方法为：下调所述人体细胞中的PTB基因；所述下调PTB是指敲低或敲除PTB基因；所述敲低/敲除PTB基因为使用如下所示重组载体：在骨架载体pTRIPZ的Xho I至EcoR 1位点间插入序列5所示DNA，得到中间载体；再向中间载体的Age1至Cla1位点间用BRN2的编码基因取代RFP，即得重组载体；（2）激活所述未成熟的神经细胞中的nPTB‑BRN2‑miR‑9信号通路，将所述未成熟的神经细胞转变为成熟神经细胞；所述nPTB‑BRN2‑miR‑9信号通路为：nPTB的下调诱导BRN2活化；被激活的BRN2上调miR‑9；miR‑9下调nPTB；所述激活未成熟的神经细胞中的nPTB‑BRN2‑miR‑9信号通路的方法为下调nPTB；所述下调nPTB是指敲低或敲除nPTB基因；所述敲低或敲除nPTB基因时使用的质粒为如下任一种：（1）将序列1所示DNA片段插入ptripz质粒的EcoRI和XhoI位点中间，即得shnptb质粒1；（2）将序列2所示DNA片段插入ptripz质粒的EcoRI和XhoI位点中间，即得shnptb质粒2；（3）将序列3所示DNA片段插入ptripz质粒的EcoRI和XhoI位点中间，即得shnptb质粒3；（4）将序列4所示DNA片段插入ptripz质粒的EcoRI和XhoI位点中间，即得shnptb质粒4；（5）shnptb质粒1、shnptb质粒2、shnptb质粒3和shnptb质粒4的混合物；所述方法为非疾病诊断和治疗的方法；所述人体细胞为离体的人体细胞。