[发明专利]一种辣木高效再生方法

摘要

本发明公开了一种辣木高效再生方法。本发明方法通过优化培养基和培养条件，克服了辣木叶片再生难的问题，提供一种以辣木叶片为外植体的辣木高效再生方法。该方法可摆脱外界条件的影响，规模化和工厂化生产出健壮、整齐一致的辣木组培幼苗；与已经报道的以下胚轴、茎节、茎尖作为外植体构建再生体系相比，具有操作方便、取材广泛、可重复性强及效率高等优势；不仅能满足市场对种苗的需求，并且可以通过转基因研究对辣木种质资源进行改良和创新，为辣木种质资源可持续利用奠定基础。

主权项

1.一种辣木高效再生方法，其特征在于，包括以下步骤：A、无菌苗的获得：将辣木种子去壳，在水中浸泡8～24h，经消毒后将种子播种于固体MS培养基上培养得到无菌苗，切取无菌苗的小叶作为外植体；B、芽的诱导及伸长：将小叶接种到芽诱导培养基上培养诱导不定芽，接种时小叶远轴面朝上，培养至外植体上有芽点出现时，将外植体转移到芽伸长培养基上在相同条件下培养诱导不定芽伸长；所述的芽诱导培养基：每升含有BA 0.8～1.2mg、KT 0.05～0.2mg、NAA0.05mg、蔗糖30g和琼脂4.5g，余量为MS培养基；所述的芽伸长培养基：每升含有BA0.4～0.6mg、NAA 0.05mg、蔗糖30g和琼脂4.5g，余量为MS培养基；C、生根培养：待不定芽伸长到3～4cm时，切取不定芽，接种于生根培养基上培养诱导生根，得到生根苗；所述的生根培养基：每升含有NAA0.1～0.2mg、蔗糖30g和琼脂4.5g，余量为MS培养基，pH 5.8～6.0；D、炼苗及移栽：将生根苗取出，洗净根上的培养基，将生根苗在水中浸泡2h，移栽到泥炭土上，进行培养管理，得到辣木植株。