[发明专利]人血清中几丁质酶3样蛋白1的检测方法及其应用在审
| 申请号： | 201610305748.1 | 申请日： | 2016-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN105866430A | 公开（公告）日： | 2016-08-17 |
| 发明（设计）人： | 章晓波;陈玉磊 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/574 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 林超 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种人血清中几丁质酶3样蛋白1的检测方法及其应用。取Dynabeads Protein G超纯水清洗，用EBC裂解液再清洗，溶于EBC裂解液中平均分成两份，对两份Dynabeads Protein G溶液进行分别孵育处理，再混合孵育获得产物，产物弃上清用EBC裂解液清洗三次，得到的沉淀用EBC裂解液重悬，再加入SDS上样缓冲液煮沸，用Western blot方法检测几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)。本发明方法简单有效，特异性好，且准确率极高。因此避免了传统的用于血清中蛋白检测的ELISA方法产生的背景高，准确性低等缺点。 | ||
| 搜索关键词： | 血清 几丁质 蛋白 检测 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种人血清中几丁质酶3样蛋白1的检测方法，其特点在于包括以下步骤：1)取40～60μl Dynabeads Protein G，超纯水清洗三次后，用1ml的EBC裂解液再清洗两次，将清洗后的Dynabeads Protein G溶于200μl的EBC裂解液中，平均分成两份；2)对两份Dynabeads Protein G溶液进行分别孵育处理，再混合孵育获得产物；3)将步骤2)得到的产物弃上清，用EBC裂解液清洗三次，得到的沉淀用50～100μl EBC裂解液重悬，再加入SDS上样缓冲液在100℃煮沸10min；4)用Western blot方法检测步骤3)得到的产物，检测几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)。
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