[发明专利]一种双向转录/表达质粒及其在流感病毒反向遗传学中的应用有效
| 申请号： | 201610309169.4 | 申请日： | 2016-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN105861555B | 公开（公告）日： | 2019-05-14 |
| 发明（设计）人： | 王晓钧;张翔;郭巍;张振宇;胡哲 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N7/01 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨;马鑫 |
| 地址： | 150001 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种双向转录/表达质粒及其在流感病毒反向遗传学中的应用。本发明的一种双向转录/表达质粒是以真核表达载体pEF4/myc‑His B为骨架进行改造得到的。为了建立马流感病毒(Equine influenza virus,EIV)的反向遗传操作系统，本发明使用构建得到的双向转录/表达质粒双向分别表达马流感病毒PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、NS以及M基因，通过共转染、测序、生长曲线的绘制和酶切鉴定，成功拯救得到一株EIV及其突变体。同时与现有的pBD系统进行产毒量的比较，表明本发明建立的反向遗传操作系统优于pBD系统。本发明的提出为流感病毒的反向遗传研究提供了一种新的技术手段，同时也为日后深入研究马流感病毒的传播，致病机理，乃至疫苗候选株的筛选奠定了坚实基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 双向 转录 表达 质粒 及其 流感病毒 反向 遗传学 中的 应用 | ||
【主权项】：
1.一种双向转录/表达载体，其特征在于以真核表达载体pEF4/myc‑His B为骨架进行改造：在所述pEF4/myc‑His B载体的KpnI和BclI酶切位点之间插入鼠源的polI终止子、BsmBI酶切位点和人源的polI启动子序列；在其SphI和BspQI酶切位点之间插入一段短的Linker序列，替换原载体上从f1ori到SV40poly A信号之间的非必需元件，所述的Linker序列为5’‑CTGGGGATGCGGTGGGCTCTATG‑3’，将改造后的载体命名为pEZ。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，未经中国农业科学院哈尔滨兽医研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201610309169.4/，转载请声明来源钻瓜专利网。
