[发明专利]基于凝集素磁珠的结合珠蛋白异质体诊断肝癌试剂盒

摘要

本发明公开了一种基于凝集素磁珠的结合珠蛋白异质体诊断肝癌试剂盒，该试剂盒包括ELISA酶标板、磁珠‑AAL、Hp‑ELISA酶标板，其利用了肝癌患者的单位Hp岩藻糖含量增多，Hp与AAL的亲和力提高这一原理，建立了磁珠‑AAL‑Hp‑ELISA检测方法来分析血清中Hp岩藻糖的表达水平；辅以常规Hp‑ELISA的蛋白检测方法，来确定血清中Hp的蛋白含量，从而完成正常人和肝癌病人血清中单位Hp蛋白中结合岩藻糖的含量(Fuc‑Hp指数)的定量，最后根据Fuc‑Hp的检测数据和临床资料的回顾性研究，建立了肿瘤判别诊断函数，可用于肝癌的早期诊断。

主权项

一种基于凝集素磁珠的结合珠蛋白异质体诊断肝癌试剂盒，其特征在于包括：ELISA酶标板、磁珠‑AAL、Hp‑ELISA酶标板以及HCC预测模型：P＝exp(‑2.554+2.009×Fuc‑Hp)/[1+exp(‑2.554+2.009×Fuc‑Hp)]；其中，Fuc‑Hp值的计算方法为：每个血清样品中Hp结合AAL的实际OD值与相同血清样品中Hp蛋白的实际OD值的比值，所述血清样品中Hp结合AAL的实际OD值通过磁珠‑AAL‑Hp‑ELISA检测得到，血清样品中Hp蛋白的实际OD值通过常规Hp‑ELISA检测得到，该模型区分肝癌病人和正常人的阈值为1.0154，大于1.0154为肝癌，小于1.0154为正常；所述磁珠‑AAL的制备方法包括步骤：1)将磁珠置于EDC溶液中反应；2)反应完成后，移除上清并用缓冲液清洗磁珠；3)取一定量的AAL置于偶联液中，加入磁珠反应；4)反应完成后，封闭未反应的活化基团。