[发明专利]参连饮降糖速崩片降糖功效的实验分析方法

摘要

参连饮降糖速崩片降糖功效的实验分析方法，属于中药学研究技术领域，包括以下步骤，步骤一、选取实验分组；步骤二、生理化指标的检测，包括小鼠空腹血糖、总胆固醇以及甘油三脂的检测，葡萄糖耐量的检测，尿量、尿蛋白以及尿白蛋白的检测，血肌酐和血清尿素氮的检测，血清钠和血清钾的检测，尿钠和尿钾的检测，体重和肾脏指数的检测；步骤三、病理学的统计；步骤四、统计结果分析；本发明通过实验对比证明参连饮降糖速崩片的有效成分人参总皂苷和黄连总生物碱结合物(简称RH)具有显著降低糖尿病患者血糖值，对早期糖尿病肾病具有一定的治疗作用。

主权项

参连饮降糖速崩片降糖功效的实验分析方法，其特征是：包括以下步骤，步骤一、选取实验分组选取250只C57小鼠，取其中20只组成CON对照组，其余230只制备为糖尿病肾病模型组；CON组喂食正常饲料，模型组喂食高脂饲料，喂养四周后，向C57小鼠腹腔注射30mg/kg的链脲佐菌素STZ两次，一周后，向CON组给予与STZ体积相同的枸橼酸缓冲液，注射STZ四周后，测量空腹血糖，空腹血糖＞7.8mmol/L为糖尿病的判断标准；取10只CON组小鼠给溶媒8周，取模型组小鼠20只给溶媒8周，取模型组小鼠20只给含人参皂苷与黄连总生物碱的混合物RH80+320mg/kg的参连饮降糖速崩片8周,取模型组小鼠20只给40+160mg/kg的RH8周，取模型组小鼠20只给20+80mg/kg的RH8周，取模型组小鼠20只给80mg/kg的人参总皂苷GG8周，取模型组小鼠20只给320mg/kg的黄连总生物碱TBG8周，取模型组小鼠20只给8mg/kg的卡托普利CAP8周；各组分别治疗8周后，小鼠禁食12h～16h,取眼球血，进行离心分离血清；取小鼠肾脏组织，其中一部分用10％的福尔马林固定，另一部分在‑80℃的冰箱内保存备用；步骤二、生理化指标的检测包括小鼠空腹血糖、总胆固醇以及甘油三脂的检测，葡萄糖耐量的检测，尿量、尿蛋白以及尿白蛋白的检测，血肌酐和血清尿素氮的检测，血清钠和血清钾的检测，尿钠和尿钾的检测，体重和肾脏指数的检测；小鼠空腹血糖、总胆固醇以及甘油三脂的检测对经所述步骤一分得的8组小鼠分别在给药前和给药8周后检测空腹血糖、总胆固醇以及甘油三脂，采用葡萄糖氧化酶法进行检测血清葡萄糖浓度，采用甘油三脂和总胆固醇酶法进行检测甘油三脂和总胆固醇；葡萄糖耐量的检测取所述步骤一中注射STZ四周后的小鼠，进行口服葡萄糖耐量测定，小鼠禁食12h～16h，自由饮水，腹腔注射40％葡萄糖，在葡萄糖注射前及在葡萄糖注射后30min，60min，120min断尾取血，3500×g离心15min，吸取血清，采用葡萄糖氧化酶法测定各时间点血清中葡萄糖含量；尿量、尿蛋白以及尿白蛋白的检测取所述步骤一中的8组给药小鼠，分别检测给药4周以及给药8周时小鼠的尿量、尿蛋白以及尿白蛋白；血肌酐和血清尿素氮的检测取所述步骤一中的8组给药小鼠，检测给药8周时小鼠的血肌酐和血清尿素氮；血清钠和血清钾的检测取所述步骤一中的8组给药小鼠，检测给药8周时小鼠的血清钠和血清钾；尿钠和尿钾的检测取所述步骤一中的8组给药小鼠，分别检测给药4周以及给药8周时小鼠的尿钠和尿钾；体重和肾脏指数的检测取所述步骤一中的8组给药小鼠，在给药的8周时间内，每周称量小鼠体重一次至给药结束,通过计算肾脏指数；步骤三、病理学的统计通过所述步骤二对小鼠各项指标的检测，分别统计给药4周和给药8周后，RH对模型组小鼠整体生理状况以及葡萄糖耐量，尿量、尿蛋白以及尿白蛋白，血肌酐和血清尿素氮，血清钠和血清钾，尿钠和尿钾，体重和肾脏指数的影响；步骤四、统计结果分析将步骤三统计的结果分别做给药4周和给药8周的柱形图，通过柱形图得出RH可降低空腹血糖，降糖效果与高剂量黄连素相同；RH可降低血清总胆固醇及甘油三酯水平，与黄连总生物碱效果相同；RH可降低24h尿量、尿蛋白和尿白蛋白排出量；RH可降低血尿素氮和血肌酐；RH可升高血钠、降低血钾，尿钠排出增多、尿钾排出减少；RH对早期糖尿病肾病具有治疗作用。