[发明专利]一种大青鲨年龄鉴定用素材的制备方法

摘要

本发明公开了一种大青鲨年龄鉴定用素材的制备方法，不同的尺寸脊椎骨使用不同的素材，大个体脊椎骨素材制备方法采用纵切片方法，小个体脊椎骨素材制备方法采用染色法；本发明通过上述方法解决了大青鲨脊椎骨不易研磨、研磨过程中易受损、切片轮纹清晰度不高等问题，大青鲨纵切片的研磨包括提取、清洗、切片、磨片、固定、抛光等过程；对大青鲨脊椎骨的纵截面进行打磨，用力均匀，打磨抛光的的脊椎骨切片用封片剂封片，保证轮纹能保持较长的时间。

主权项

1.一种大青鲨年龄鉴定用素材的制备方法，其特征在于，不同的尺寸脊椎骨使用不同的制备方法，大个体脊椎骨素材制备方法包括如下步骤：(1)提取：自第一背鳍处取约3‑5节脊椎骨，冷冻保存；(2)清洗：将脊椎骨置于沸水中煮约5min，除去多余的结缔组织，若仍不干净，将其置于0.5％氢氧化钠溶液中浸泡，根据脊椎骨的尺寸，浸泡时间为约8h‑12h，后至于蒸馏水浸泡中约30min；(3)切片：脊椎骨固定于低速切片机上，纵切片切割至1‑2mm，将纵切片的近椎体中心面在1200^#的砂纸上打磨至椎体平面，于抛光机上抛光研磨面；固定：用强力速粘胶将纵切片粘在载玻片上，椎体中心面朝下；磨片：用800^#的砂纸、1200^#的砂纸细磨切片，并随时在透射光解剖镜下观察其研磨程度，至接近椎体中心处，切片研磨厚度为0.4‑0.5mm，在抛光机上抛光研磨面；封片：将载玻片泡在60℃水中5‑10分钟后取下切片，干燥后用PermountTM封片剂固定脊椎骨纵切片于载玻片上，盖上盖玻片；小个体脊椎骨素材的制备方法包含如下步骤：(1)提取：自第一背鳍处取约3‑5节脊椎骨，冷冻保存；(2)清洗：将脊椎骨置于沸水中煮约5min，除去多余的结缔组织，若仍不干净，将其置于0.5％氢氧化钠溶液中浸泡，根据脊椎骨的尺寸，浸泡时间为约8h‑12h，后至于蒸馏水浸泡中约30min，并晾干；(3)染色：将干燥的完整脊椎骨置于10％硝酸钴溶液中24h，取出后，并蒸馏水洗干净，最终晾干；大个体脊椎骨为叉长≥220cm的大青鲨个体，所述小个体脊椎骨为叉长＜220cm的大青鲨个体。