[发明专利]一种含有表皮干细胞分泌素的抗衰老护肤品及其制备方法

摘要

本发明属于护肤品领域，具体涉及一种含有表皮干细胞分泌素的抗衰老护肤品及其制备方法。所述的护肤品由以下重量百分比计的组分组成：表皮干细胞分泌素0.000001‑0.0005％、植物提取物2～8％、角鲨烷1～2％、EDTA‑2Na 0.10～0.25％、甘油5～10％、聚谷氨酸0.05～1％、K350 0.06～0.12％、肉豆蔻酸异丙酯2～6％、鲸蜡硬脂醇0.5～2％、聚二甲基硅氧烷1～2％，余量为水；其中，所述植物提取物由海红豆、雪丽花、刺五、冬青皮和覆盆子制备而成。本发明护肤品显著改善皮肤老化，延缓衰老，降低不良反应的发生，且制备方法简单，性质稳定。

主权项

1.一种含有表皮干细胞分泌素的抗衰老护肤品，其特征在于，所述护肤品由以下重量百分比计的组分组成：表皮干细胞分泌素0.000001‑0.0005％、植物提取物2～8％、角鲨烷1～2％、EDTA‑2Na 0.10～0.25％、甘油5～10％、聚谷氨酸0.05～1％、K350 0.06～0.12％、肉豆蔻酸异丙酯2～6％、鲸蜡硬脂醇0.5～2％、聚二甲基硅氧烷1～2％，余量为水；所述表皮干细胞分泌素为人的表皮干细胞分泌的多种活性因子的混合物；所述表皮干细胞分泌素的制备方法包括以下步骤：(1)人表皮干细胞的获取取手术切除或刮取口腔上皮组织，将组织转入含有青霉素、链霉素和硫酸庆大霉素的D‑PBSA(磷酸盐缓冲液)中，干冰或液氮冷冻条件下运回实验室，反复漂洗2‑3次，加入胰蛋白酶37℃消化30min，将口腔上皮组织剪碎，用70‑100um细胞过滤器过滤上皮细胞，收集滤液，1200r/min条件下离心5min，弃上清，用Defined Keratinocyte‑SFM培养基轻柔吹打，得细胞悬液，利用胶原快速贴附法分离纯化人表皮干细胞；(2)人表皮干细胞的培养将步骤(1)得到的人表皮干细胞接种在含有100U/ml青霉素和100ug/ml链霉素Defined Keratinocyte‑SFM培养基中，37℃、5％CO2培养箱孵育12‑24h，弃培养基，重新加入新鲜的含有青霉素和链霉素Defined Keratinocyte‑SFM培养基，培养1‑3d，弃培养基，加入Defined Keratinocyte‑SFM培养基继续培养，待人表皮干细胞接近90％融合时，传代培养；(3)表皮干细胞分泌素的制备将人表皮干细胞扩增1‑5代，收集培养上清液，将上清液用0.22μm的无菌过滤器过滤，合并每一代的滤液即得表皮干细胞分泌素；所述植物提取物由以下重量百分计的原料制备而得：海红豆16～28％、雪丽花14～30％、刺五加12～28％、冬青皮14～26％和覆盆子10～22％；所述植物提取物的制备方法包括以下步骤：分别按比例取各味药材，洗去杂质，干燥后粉碎，过50～60目筛，合并粗粉，加入药材粗粉总重量8～12倍量体积分数为50～70％的乙醇，微波提取4～6分钟，微波功率为400～500W，提取温度为40～60℃，将提取液过滤，按同样条件重复提取1次，合并提取液，减压浓缩至60℃下测相对密度为1.05～1.15的浸膏，制得植物提取物。