[发明专利]一种瑞加诺生的α异构体杂质及其制备方法和用途

摘要

本发明公开了一种瑞加诺生的α异构体杂质，及其制备方法和医药用途。该杂质是通过定向合成所得，以2,6‑二氯腺嘌呤与β‑D‑四乙酰基核糖为起始原料，经缩合、氨解、成盐纯化获得α型的2‑氯腺苷的盐，再不经游离直接经过肼解、缩合、氨解得到瑞加诺生α异构体杂质。本发明将该异构体作为瑞加诺生杂质对照品，能够有效鉴定合成中产生该杂质的含量，从而提高了瑞加诺生的药品质量标准。

主权项

1.一种瑞加诺生α异构体杂质的制备方法，其特征在于，具体包含如下步骤：(1) 在氮气保护下，将2,6‑二氯腺嘌呤与β‑D‑四乙酰基核糖溶于无水的甲基四氢呋喃中，降温至‑5℃，加入酸性树脂催化剂Amberlyst 15和3A分子筛，待搅拌均匀后，缓慢滴加四氯化锡的无水甲基四氢呋喃溶液，控制反应温度在‑5至0℃，滴毕，加入乙酸异丙酯，缓慢升至30‑35℃继续反应3‑4h，TLC监测反应完全后，过滤，滤液在强烈搅拌下，缓慢加入饱和碳酸氢钠溶液，二氯甲烷萃取，合并有机相，浓缩至干后加入甲基叔丁基醚打浆1h，抽滤所得固体，烘干，即得式2化合物；其中，2,6‑二氯腺嘌呤：β‑D‑四乙酰基核糖的摩尔比为1:1.1至1:1.2；无水甲基四氢呋喃：2,6‑二氯腺嘌呤的体积质量比为20g/mL至30g/mL；乙酸异丙酯：无水甲基四氢呋喃的体积比为1:2；2,6‑二氯腺嘌呤：四氯化锡：Amberlyst 15的重量比为1:0.9:0.5；3A分子筛重量为2,6‑二氯腺嘌呤与β‑D‑四乙酰基核糖的总重量的2%；(2) 将式2化合物溶于异丙醇中，通入干燥的氨气，在30℃下搅拌反应12h，浓缩至干，得到式3化合物；(3) 将式3化合物溶于二氧六环中，加入L‑酒石酸，在60℃下搅拌反应4h，缓慢滴加乙酸乙酯，滴毕，降温至0℃，搅拌析晶2h，抽滤所得固体，烘干，即得式4化合物，HPLC纯度为99.7%；(4) 将式4化合物加入95%乙醇中，在58℃下搅拌溶解，在氮气保护下，加入一水合肼，温度升至68℃反应15h，将反应液缓慢加入冰水中，搅拌1h，过滤所得固体，烘干，即得式5化合物；其中，一水合肼：式4化合物的摩尔比为12:1；(5) 在氮气保护下，将式5化合物溶于异丙醇中，加热至75℃，加入2‑甲酰基‑3‑氧代丙酸乙酯反应2h，TLC监测反应完全后，倒入冰水中，搅拌0.5h，过滤所得固体，用体积比为1:4的异丙醇/水混合溶剂打浆搅拌上述固体，抽滤干燥后得到式6化合物；其中式5化合物：2‑甲酰基‑3‑氧代丙酸乙酯的摩尔比为1:1.2；(6) 在常压下，将式6化合物溶解于含甲胺40%w/w的甲醇溶液中，在温度35℃搅拌反应12h，其中，式6化合物：甲胺甲醇溶液的质量比为1:30，当TLC监测反应完全后，浓缩反应液，加入甲基叔丁基醚醚，搅拌过滤，得到式1化合物粗品；（7）将式1化合物粗品加入到体积比为1:2:1的DMF/乙醇/水的混合溶剂，该混合溶剂：粗品的体积重量比为8L/Kg‑12L/Kg，回流搅拌1h后溶解，缓慢降温至0‑5℃，静置析晶3h，抽滤所得固体，烘干得到式1化合物精制品。