[发明专利]一种草莓黄萎病菌孢子悬浮液的制备方法

摘要

本发明公开一种草莓黄萎病菌孢子悬浮液的制备方法，所述方法包括以下步骤：采集草莓黄萎病病株，分离、纯化和筛选出草莓黄萎病的致病菌；将分离的黄萎病病菌接种到PDA培养基平板培养和活化；将含有活化的病菌的琼脂块取下，加入液体VL培养基+2.0％的蔗糖中震荡培养，经纱布过滤和滤纸抽真空过滤以去除剩余的菌丝，滤液备用；将滤液离心，弃上清，用2ml无菌水重悬沉淀，即得到草莓黄萎病菌孢子悬浮液。本发明采用液体培养基接种和培养方式，能够较快长满整个液体培养基，节省人力和物力的消耗。本发明接种量少，孢子产生的速度快、生长快，同一病菌同批次、不同批次间制备孢子量差异小，方法稳定性好。

主权项

一种草莓黄萎病菌孢子悬浮液的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)采集草莓黄萎病病株，在病样茎基部病健交界处切取10mm²的组织块，75％酒精消毒30s，无菌水漂洗3次，无菌吸水纸吸干，接种在PDA培养基上，25℃条件下培养3～4天后转接和纯化，4℃甘油冷冻保存备用；(2)将分离的黄萎病病菌接种到PDA培养基平板上进行活化，黑暗条件下于24℃恒温培养6‑7d；(3)将步骤(2)中含有活化病菌的琼脂块置于液体VL培养基+2.0％的蔗糖中，于26℃条件下恒温震荡培养6‑7d，将培养液经纱布过滤、抽真空过滤去除剩余的菌丝，滤液备用；(4)将步骤(3)滤液在10000rmp/min条件下离心30min，去上清液，用2ml无菌水重悬沉淀，即得到黄萎病菌孢子悬浮液。