[发明专利]微生物发酵法高效生产L‑色氨酸的方法

摘要

本发明涉及微生物发酵法高效生产L‑色氨酸的工艺方法，包括以下步骤（1）、培养成熟的大肠埃希氏菌JLTrp菌种；（2）、发酵罐培养将成熟菌种接种至发酵罐内，在温度34‑36℃，pH采用补充液氨分段控制，0‑18h7.0‑7.2，18h‑放罐6.4‑6.8，溶氧分段控制，0‑18h10‑25%，18h‑放罐15‑40%，压力0.03‑0.08MPa，风量0.3VVM‑2.0VVM，过程中残糖控制0.01‑0.5%下培养制取L‑色氨酸本发明针对培养基成分及培养条件佳，并且对发酵过程残糖浓度控制、温度控制、pH 与溶解氧分段控制，使发酵周期缩短，发酵产量提高，工艺简单易控制，成本较低，适合大规模工业应用。

主权项

微生物发酵法生产L‑色氨酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）、培养成熟的菌种：先对种子培养罐进行空罐灭菌，向种子培养罐中加入液体种子培养基后再进行实罐灭菌；实罐灭菌结束后降温冷却；制备接种用菌液，然后进行接种，在以下条件下进行培养后得到成熟菌种：培养温度34‑36℃，pH6.8‑7.2，溶氧＞25%，压力0.03‑0.08MPa，风量0.3VVM‑2.0VVM；（2）、发酵罐培养：先对发酵罐进行空罐灭菌，向发酵罐中加入液体发酵培养基后再进行实罐灭菌；实罐灭菌结束后降温冷却，然后将步骤（1）得到的成熟菌种接种至发酵罐内，在以下条件下进行培养以制取L‑色氨酸：培养温度34‑36℃，pH采用补充液氨分段控制，0‑18h7.0‑7.2，18h‑放罐6.4‑6.8，溶氧分段控制，0‑18h10‑25%，18h‑放罐15‑40%，压力0.03‑0.08MPa，风量0.3VVM‑2.0VVM，过程中残糖控制0.01‑0.5%；所述菌种为大肠埃希氏菌JLTrp，其分类命名为大肠埃希氏菌（Escherichia coli）JLTrp，菌种保藏编号为CGMCC NO. 7.217；步骤（1）中所述液体种子培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖1.4‑6.0%、酵母粉0.05‑0.3%、(NH4)2HPO4 0.1‑0.8%、KCl 0.05‑0.3%、MgSO4 0.08‑0.45%、(NH4)2SO4 0.06‑0.24%、柠檬酸0.08‑0.42%、 FeSO4 0.00014‑0.00042%、MnSO4 0.00006‑0.00036%、维生素B1 0.000065‑0.00039%和生物素0.00001‑0.00012%，其余为水；步骤（2）中所述液体发酵培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖1%、酵母粉0.1%、(NH4)2HPO4 0.12‑0.8%、KCL 0.12‑0.8%、MgSO4 0.05‑0.5%、(NH4)2SO4 0.08‑0.48%、柠檬酸0.05‑0.5%、 FeSO4 0.001‑0.1%、Na2SO4 0.0005‑0.006%、MnSO4 0.00015‑0.0009%、CuSO4 0.00002‑0.00018%、CoCl2 0.00014‑0.00135%和ZnSO4 0.0001‑0.0018%，其余为水。