[发明专利]一种香菇423-9菌株的特异性分子标记及其获得方法与应用有效
申请号: | 201610325275.1 | 申请日: | 2016-05-16 |
公开(公告)号: | CN105821139B | 公开(公告)日: | 2019-09-27 |
发明(设计)人: | 周陈力;鲍大鹏;茅文俊;万佳宁;李燕;奚莉萍;冯爱萍;汪滢;王莹;高英女;杨瑞恒;龚明;唐利华 | 申请(专利权)人: | 上海市农业科学院 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人: | 黄志达;魏峯 |
地址: | 201106 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种香菇423‑9菌株的特异性分子标记及其获得方法与应用,其序列如SEQ ID NO.1所示。获得方法包括:(1)基因组DNA的提取;(2)PCR扩增反应;(3)琼脂糖凝胶电泳检测。用于鉴别香菇423‑9菌株。本发明与常规形态学检测、拮抗试验、出菇试验相比,具有检测时间短、准确性高、可重复性好的优点,在收集的香菇菌株中具有423‑9菌株的专一性。 | ||
搜索关键词: | 一种 香菇 423 菌株 特异性 分子 标记 及其 获得 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.一种香菇423‑9菌株的特异性分子标记的获得方法,包括如下步骤:(1)提取香菇423‑9菌株的基因组DNA,香菇423‑9菌株的保藏号为CGMCC NO.11915;提取方法具体为:将香菇423‑9菌株转接到马铃薯葡萄糖培养基中,25‑26℃下避光摇瓶培养,4‑5d后收集菌丝装入无菌容器中,‑70℃冷冻保存备用;用改进的CTAB法提取基因组DNA,‑20℃贮藏备用;(2)进行PCR扩增反应;其中,引物序列为:LEpyrF‑F1150:CGCTTTATCTTTTATCTCGTGCTCAT;LEpyrF‑R1150:GAACGGTGTAGTAAGACAGGTAGTCA;(3)琼脂糖凝胶电泳检测,得到长度为1067bp的条带,即为香菇423‑9菌株的特异性分子标记,其序列如SEQ ID NO.1所示。
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